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新生小鼠Lin~- Sca-1~+心脏干细胞分离培养方案的优化  
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【英文篇名】 Optimization of isolation and culture of Lin~- Sca-1~+ cardiac stem cells from newborn mice
【下载频次】 ★★★★
【作者】 李端端; 石山慧; 周密; 马秀霞; 高建忠; 张雅琼; 杨丽文; 左琳;
【英文作者】 LI Duan-Duan; SHI Shan-Hui; ZHOU Mi; MA Xiu-Xia; GAO Jian-Zhong; ZHANG Ya-Qiong; YANG Li-Wen; ZUO Lin; Department of Physiology; Basic Medical College; Shanxi Medical University; Department of Pathology; the First Affiliated Hospital; The First Affiliated Hospital; The Second Affiliated Hospital;
【作者单位】 山西医科大学基础医学院生理系; 山西医科大学第一临床医学院; 山西医科大学第二临床医学院;
【文献出处】 生理学报 , Acta Physiologica Sinica, 编辑部邮箱 2017年 04期  
期刊荣誉：中文核心期刊要目总览  ASPT来源刊  中国期刊方阵  CJFD收录刊
【中文关键词】 干细胞; 分离和纯化; 原代培养; 鉴定;
【英文关键词】 stem cells; isolation and purification; primary cell culture; identification;
【摘要】 心脏原位干细胞(cardiac stem cells,CSCs)治疗心肌梗死具有公认的疗效,但是其分离及培养技术尚不完善,这是制约其临床应用的关键技术问题。为解决这一问题,本研究旨在优化Lin~-(lineage-negative)Sca-1~+(stem cell antigen-1-positive)CSCs分离方案。用组织块酶解法(混合酶液)分离C57BL/6J新生(出生0～3天)小鼠Lin~- Sca-1~+ CSCs。在已有的研究基础上,严格控制消化时间、次数、温度、搅拌速度、离心时间和转速等多重因素,结合免疫磁珠分选获得纯度较高的Lin~- Sca-1~+ CSCs。此后,对分离纯化的原代细胞进行培养,优化培养基成分、换液时间和方式。采用流式细胞术及免疫荧光染色技术,检测分选细胞的纯度及传代培养细胞中Sca-1~+细胞的百分比。结果显示:(1)本法分离获得的Lin~- Sca-1~+ CSCs纯度高达(85.03±5.60)%;(2)离体培养过程中,细胞生长状态良好,原代培养5天开始有干细胞克隆球生成,培养7天即可铺满皿底,生长曲线显示,离体培养第3天细胞进入对数增长期;(3)免疫组化染色结果显示...
【英文摘要】 Cardiac stem cells(CSCs) transplantation has been recognized to be effective on the treatment of myocardial infarction(MI), but some techniques still need to be developed in the isolation and culture of CSCs, which is the key problem restricting the clinical application of CSCs. This study was focused on the isolation of Lin~-(lineage-negative) Sca-1~+(stem cell antigen-1-positive) CSCs from newborn C57BL/6J mice(0–3 d) by mixed enzymatic-explant isolation in combination with immunomagnetic separation. The ...
【基金】 supported by the National Natural Science Foundation of China(No.81200120); Research Project of Shanxi Scholarship Council of China(No.2014-036); Shanxi Province Youth Science and Technology Research Fund,China(No.201601D202106)
【更新日期】 2017-09-20
【分类号】 R542.22
【正文快照】 心肌梗死(简称心梗)是一类严重危害人类健康的心血管疾病,其发病率和死亡率呈逐年上升趋势[1]。针对心梗的药物治疗、介入治疗及外科手术等只能恢复局部心肌的血液供应,延缓心衰的发生,而并不能解决心梗后心肌细胞数目减少、心脏功能进行性下降这些根本问题[2]。干细胞研究提出

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