结核分枝杆菌S1蛋白的原核表达条件优化

【摘要】 目的对结核分枝杆菌S1蛋白的表达质粒进行表达条件优化。方法将构建的表达质粒转化大肠杆菌Rosetta（DE3）菌株,异丙基β-D-硫代半乳糖苷（Isopropylβ-D-Thiogalactoside,IPTG）诱导表达融合蛋白,对细菌浓度、IPTG终浓度、诱导温度和诱导时间进行筛选,聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）检测不同表达条件的细菌培养上清中目的蛋白的表达量。结果 SDS-PAGE检测中,在细菌浓度OD₆₀₀为0.8,IPTG的终浓度为0.5 m M,诱导表达的温度为25℃,诱导16 h的条件下,S1蛋白的条带灰度值和相对占比为本体系下最佳。结论建立了S1蛋白在大肠杆菌Rosetta（DE3）菌株中诱导表达的最佳条件。更多还原