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重症肌无力患者肌细胞中LRP4胞内区与SNX17的相互作用  
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【英文篇名】 Expression of LRP4 intracellular region and its interaction with SNX17 in muscle cells from patients with myasthenia gravis
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【作者】 安颖; 吕杰; 张迎娜; 高峰; 张婧; 方华; 李倩如; 杜英; 张清勇; 王金兰; 张运克;
【英文作者】 AN Ying; LYU Jie; ZHANG Yingna; GAO Feng; ZHANG Jing; FANG Hua; LI Qianru; DU Ying; ZHANG Qingyong; WANG Jinlan; ZHANG Yunke; Department of Neurology; the Second Affiliated Hospital; Zhengzhou University; Department of Neuroimmunology; Institute of Medical and Pharmaceutical Sciences; Department of Immunology; College of Basic Medical Sciences; Department of Thoracic Surgery; Department of Rehabilitation; Institute of Rehabilitation M...;
【作者单位】 郑州大学第二附属医院神经内科; 郑州大学医药科学研究院神经免疫学研究室; 郑州大学基础医学院免疫学系; 郑州大学第二附属医院普胸外科; 河南中医药大学康复医学院康复办公室;
【文献出处】 郑州大学学报(医学版) , Journal of Zhengzhou University(Medical Sciences), 编辑部邮箱 2017年 02期  
期刊荣誉:中文核心期刊要目总览  ASPT来源刊  中国期刊方阵  CJFD收录刊
【中文关键词】 低密度脂蛋白受体相关蛋白4; 分拣微管连接蛋白17; 重症肌无力; 免疫共沉淀;
【英文关键词】 low density lipoprotein receptor-related protein 4; sorting nexin 17; myasthenia gravis; co-immunoprecipitation;
【摘要】 目的:探讨低密度脂蛋白受体相关蛋白4(LRP4)和分拣微管连接蛋白17(SNX17)在重症肌无力(MG)患者肌细胞中相互作用关系。方法:分别构建原核表达载体p ET30a-LRP4胞内区和真核表达载体p EASY-Blunt M2-SNX17,在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达相对分子质量约为17 800的His-LRP4胞内区,在HEK293T细胞中诱导表达相对分子质量约为53 000的Myc-SNX17。利用抗Myc单克隆抗体磁珠与抗His单克隆抗体磁珠进行双向免疫共沉淀(Co-IP),以验证LRP4、SNX17两种蛋白分子是否存在相互作用。结果:成功构建了原核表达载体pE T30a-LRP4胞内区和真核表达载体pE ASY-Blunt M2-SNX17;抗Myc单克隆抗体磁珠与His-LRP4混合后不发生共沉淀,如再与Myc-SNX17混合则可发生共沉淀;抗His单克隆抗体磁珠与Myc-SNX17混合后不发生共沉淀,再与His-LRP4胞内区混合可发生共沉淀。结论:原核表达的LRP4胞内区蛋白与真核表达的SNX17体外可发生直接结合。
【英文摘要】 Aim: To explore the interaction between LRP4 and SNX17 at the neuromuscular junction( NMJ) in patients with myasthenia gravis( MG). Methods: We constructed prokaryotic expression vector p ET30a-LRP4 intracellular region,transformed it into E. coli BL21( DE3) bacteria and induced expression of His-LRP4 intracellular region with relative molecular weight of about 17 800; we constructed eukaryotic expression vector p EASY-Blunt M2-SNX17,transfected it into HEK293 T cells and expressed Myc-SNX17 with relative m...
【基金】 国家自然科学基金资助项目81471545; 河南省高等学校重点科研项目计划16A320010;17A320046; 河南省科技攻关计划项目1721023010298; 河南省高校科技创新团队项目16IRTSTHN022
【更新日期】 2017-04-06
【分类号】 R746.1
【正文快照】 M2-SNX17,在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达相对分子质量约为17 800的His-LRP4胞内区,在HEK293T细胞中诱导表达相对分子质量约为53 000的Myc-SNX17。利用抗Myc单克隆抗体磁珠与抗His单克隆抗体磁珠进行双向免疫共沉淀(Co-IP),以验证LRP4、SNX17两种蛋白分子是否存在相互作用。结?

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