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特氏杜氏藻中乙酰辅酶A合成酶的基因克隆、表达、纯化及活性测定  
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【英文篇名】 Cloning, Expression, Purification, and Activity Assay of Acetyl-CoA Synthetase from Dunaliella tertiolecta
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【作者】 金宏昊; 梁明华; 姜建国;
【英文作者】 JIN Hong-hao; LIANG Ming-hua; JIANG Jian-guo; College of Food Science and Engineering; South China University of Technology;
【作者单位】 华南理工大学食品科学与工程学院;
【文献出处】 现代食品科技 , Modern Food Science and Technology, 编辑部邮箱 2017年 03期  
期刊荣誉：中文核心期刊要目总览  ASPT来源刊  CJFD收录刊
【中文关键词】 乙酰辅酶A合成酶; 特氏杜氏藻; 基因克隆; 纯化; 比酶活;
【英文关键词】 acetyl-coenzyme A synthetase; Dunaliella tertiolecta; gene cloning; purification; specific enzyme activity;
【摘要】 乙酰辅酶A合成酶(ACS)催化合成乙酰辅酶A,它是油脂代谢和醋酸盐代谢的重要节点之一。本研究利用反转录PCR(RT-PCR)技术和cDNA末端快速扩增(RACE)技术分离得到了特氏杜氏藻(Dunaliella tertiolecta)乙酰辅酶A合成酶(Dt ACS)的c DNA全长(2464 bp),预测其开放阅读框(ORF)为2184 bp,727个氨基酸由此段编码。序列比对显示Dt ACS与绿藻ACS最为相似(与衣藻Chlamydomonas reinhardtii有68%一致;与团藻Volvox carteri f.nagariensis有70%一致)。选用带有硫氧还蛋白标签(Trx-tag)的pET32a(+)作为原核表达载体,并将Dt ACS转入pET32a(+)中从而构建了pET-32a-Dt ACS质粒。将其转入BL21(DE3)感受态细胞中,同时将pET-32a空载体也转入BL21(DE3)感受态细胞中,分别得到重组菌pET-32a-Dt ACS-BL21(DE3)和对照菌种pET-32a-BL21(DE3)。将重组菌在18℃、终浓度为0.6 mmol/L的IPTG条件下诱导12 h,表达出来...
【英文摘要】 Acetyl-coenzyme A(CoA) synthetase(ACS) catalyzes the synthesis of acetyl-CoA and is one of the important hubs of fat and acetate metabolism. In this study, reverse-transcription polymerase chain reaction(RT-PCR) and rapid amplification of c DNA ends(RACE) techniques were used to obtain ACS c DNA from Dunaliella tertiolecta(Dt ACS). The c DNA contained 2,464 base pairs(bp)(full-length). The predicted length of open reading frame(ORF) was 2,184 bp, and 727 amino acids were encoded by the ORF. Sequence alignme...
【基金】 国家自然科学基金项目(31171631)
【更新日期】 2017-04-25
【分类号】 Q943.2
【正文快照】 乙酰辅酶A(acetyl-Co A)是生物细胞内的重要因子,它直接参与了诸如糖酵解途径、脂肪酸代谢、氨基酸代谢和糖异生作用等重要代谢过程。乙酰辅酶A在醋酸盐代谢过程中处在一个中心位置,醋酸盐排泄(异化)和吸收(同化)作用的物质流都会经这一点[1]。在这个醋酸盐活化途径中,一种相对

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