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曲霉N1-14’高产L-苹果酸相关基因的克隆与分析  
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【英文篇名】 Cloning and Characterization of the Genes Related to High Production of L-malate in Aspergillus sp.N1-14'
【下载频次】 ★★☆
【作者】 乐贤松; 吴军林; 吴清平; 张菊梅; 郭伟鹏;
【英文作者】 LE Xian-song; WU Jun-lin; WU Qing-ping; ZHANG Ju-mei; GUO Wei-peng; South China Sea Institute of Oceanology; Chinese Academy of Sciences; Guangdong Institute of Microbiology; State Key Laboratory of Applied Microbiology Southern China; Guangdong Provincial Key Laboratory of Microbial Culture Collection and Application; Guangdong Open laboratory of Applied Microbiology; University of the Chinese Academy of Sciences; Guangdong Huankai Microbial Sci.& Tech.Co.Ltd.;
【作者单位】 中国科学院南海海洋研究所; 广东省微生物研究所省部共建华南应用微生物国家重点实验室广东省菌种保藏与应用重点实验室广东省微生物新技术公共实验室; 中国科学院大学; 广东环凯微生物科技有限公司;
【文献出处】 现代食品科技 , Modern Food Science and Technology, 编辑部邮箱 2017年 02期  
期刊荣誉：中文核心期刊要目总览  ASPT来源刊  CJFD收录刊
【中文关键词】 曲霉N1-14’; PYC; MDH; 序列分析;
【英文关键词】 Aspergillus N1-14'; pyruvate carboxylase; malate dehydrogenase; sequence analysis;
【摘要】 为了解曲霉(Aspergillus sp.)N1-14’的高产L-苹果酸(LMA)机制,提取其总DNA作模板,设计同源引物扩增包含丙酮酸羧化酶基因(pyc)和苹果酸脱氢酶基因(mdh)全长的片段并测序,再参考测序结果找到丙酮酸羧化酶(PYC)和苹果酸脱氢酶(MDH)的编码区,设计引物从N1-14’总cDNA扩增出其编码序列并通过TA克隆测序。测序结果显示pyc基因编码区长3582 bp,编码1193aa,分析结果显示PYC氨基酸序列在曲霉属内相当保守,同源性高达90%以上,其中N1-14’在两个保守位点出现突变,833位的A位于一个环区和1022位的F位于α-螺旋中部,可能与其高产酸活性相关;mdh编码区全长1023 bp,编码340aa。MDH氨基酸序列高度保守,突变株同样有两个保守区出现氨基酸点突变,且两点均出现在α-螺旋区域。本试验主要克隆两个曲霉N1-14’产L-苹果酸通路关键酶基因,分析其种属的特异性及预测特异氨基酸位点的功能,为继续探究N1-14’的高产LMA机制及相应的基因工程改造提升产酸水平奠定基础。
【英文摘要】 In order to understand the mechanism behind the high production of L-malate(LMA) by Aspergillus sp.N1-14',its total DNA was extracted to be used as the template,homologous primers were designed to amplify the segment containing the full length of the pyruvate carboxylase gene(pyc) and the malate dehydrogenase gene(mdh),and sequencing was then performed.Based on the results of this sequencing,the coding regions of pyc and mdh were identified,their coding sequences were amplified from the total c DNA of N1-14...
【基金】 国家自然科学基金项目(31271940)
【更新日期】 2017-03-23
【分类号】 TS202.3
【正文快照】 苹果酸,又名2-羟基丁二酸,自然界存在三种形式的苹果酸,D-苹果酸、L-苹果酸(L-malic acid,LMA)和DL-苹果酸混合物。LMA是继柠檬酸之后的一种极有发展前途的有机酸产品,在食品工业中,L-苹果酸是继柠檬酸和乳酸之后用量排第3位的食品添加剂,目前主要用作饮料及食品工业中的酸味剂

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