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黄粉虫纤溶活性基因的克隆及在毕赤酵母中的表达及活性检测  
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【英文篇名】 Cloning of Tenebrio Fibrinolyric Proteins gene and Expression in Pichia pastoris and Biological Activities Assay
【下载频次】 ★★★★☆
【作者】 韩雅莉; 林非凡; 林泽飞; 段雪娟; 朱晓琳;
【英文作者】 Han Ya-li; Lin Fei-fan; Lin Ze-fei; Duan Xue-juan; Zhu Xiao-ling; School of Chemical Engineering and Light Industry; Guangdong University of Technology;
【作者单位】 广东工业大学轻工化工学院;
【文献出处】 广东工业大学学报 , Journal of Guangdong University of Technology, 编辑部邮箱 2017年 01期  
期刊荣誉:ASPT来源刊  CJFD收录刊
【中文关键词】 黄粉虫; 纤溶酶; 基因; 载体pPIC9K; 毕赤酵母; 表达及活性检测;
【英文关键词】 Tenebrio molitor L.; fibrinolyric protein; gene; vector pPIC9K; Pichia pastoris GS115; expression and biological activities assay;
【摘要】 采用PCR技术,以含有TFP(Tenebrio Fibrinolyric Proteins,TFP)c DNA质粒作为模板,扩增出TFP基因片段.将克隆获得的目的基因插入到毕赤酵母表达载体p PIC9K中,经测序无误后,获得重组表达质粒p PIC9K-TFP.将重组表达质粒线性化后电击转化到毕赤酵母GS115中,经筛选并PCR验证获得多拷贝整合型酵母工程菌,对工程菌进行发酵和甲醇诱导表达.阳性样品经纤溶平板实验验证,表明该表达蛋白具有生物活性.
【英文摘要】 In this paper, TFP fragment was firstly obtained by PCR amplification using a plasmid which contains TFP c DNA as a template. The amplified fragment wascloned into P. Pastoris expressing vector p PIC9 K. After confirming through sequencing, a recombinant expression plasmid p PIC9K-TFPisobtained. The plasmid islinearized and then transformed into P. Pastoris cell GS115 by electroporation. The positive recombinantis screened and confirmed by PCR. A single colony is used fermented which grew at 30 ℃ in a shaki...
【基金】 国家自然科学基金资助项目(30772739); 海口市重点科技计划项目(2011-0044)
【更新日期】 2017-02-23
【分类号】 Q78;R91
【正文快照】 血栓是威胁人类生命和健康的多发性疾病,此类疾病主要为血栓导致血管腔狭窄或堵塞,以及血流不畅和血管所在脏器和组织发生局部缺血或梗死.因此,预防血栓形成及有效治疗血栓类病,对于维护公众健康和提高人类生存质量有着极为重要的意义.黄粉虫(Tenebrio molitor L.)隶属于鞘翅目

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