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日本血吸虫重组抗原rSj26的磁分离酶联免疫分析的建立及其在低感染度血清抗体检测中的应用  
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【英文篇名】 Establishment of Magnetic Affinity Enzyme Linked Immunoassay Based on Schistosoma japonicum Recombinant Antigen Sj26 and Its Application in Detection of Serum Antibody with Low Intensity of Infection
【下载频次】 ★★
【作者】 余琴; 朱艳红; 关飞; 杨海;
【英文作者】 YU Qin; ZHU Yan-hong; GUAN Fei; YANG Hai; Department of Clinical Laboratory; Wuhan Blood Center; College of Life Science and Technology; Huazhong University of Science and Technology; Department of Parasitology; Tongji Medical College;
【作者单位】 武汉血液中心检验科; 华中科技大学生命科学院; 华中科技大学同济医学院寄生虫学教研室;
【文献出处】 中国寄生虫学与寄生虫病杂志 , Chinese Journal of Parasitology and Parasitic Diseases, 编辑部邮箱 2016年 04期  
期刊荣誉：中文核心期刊要目总览  ASPT来源刊  CJFD收录刊
【中文关键词】 日本血吸虫; 重组抗原Sj26; 抗体; 磁分离酶联免疫法; ELISA;
【英文关键词】 Schistosoma japonicum; rSj26; Antibody; Magnetic affinity enzyme-linked immunoassay; ELISA;
【摘要】 目的建立基于重组日本血吸虫抗原Sj26(rSj26)的磁分离酶联免疫分析(rSj26-MEIA),并将其用于检测低感染度的日本血吸虫病患者的血清抗体。方法将重组质粒pET28a-Sj26转化至大肠埃希菌(Escherichia coli)BL21,用0.6 mmol/L异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,表达产物经镍柱亲和层析法纯化后,二喹啉甲酸(BCA)法测定蛋白含量,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白质印迹(Western blotting)检测分析rSj26。将纯化后的rSj26与磁珠偶联(100μg抗原/mg磁珠),优化反应条件,建立rSj26-MEIA方法。用rSj26-MEIA和ELISA分别检测58份低密度感染的日本血吸虫病患者血清、30份非血吸虫病流行区阴性血清和6份并殖吸虫病患者血清,并比较两者的检测结果。结果纯化后的重组蛋白含量测定结果显示,rSj26浓度为2.5 mg/ml。SDS-PAGE结果显示,rSj26相对分子质量约27 000,主要以可溶性的形式表达。Western blotting结果显示,rSj26可被感染日本血吸虫的兔血清和小鼠血清...
【英文摘要】 Objective To develop the magnetic affinity enzyme-linked immunoassay(MEIA) using recombinant glutathione-S-transferase of Schistosoma japonicum with a relative molecular weight of 26 000(rSj26-MEIA) for antibody detection under low intensity infection. Methods The recombinant plasmid pET28a-Sj26 was transformed into Escherichia coli strain BL21, and 0.6 mmol/L isopropyl β-D-1-thiogalactopyranoside(IPTG) was used to induce its expression. The expression products were purified by Ni~(2+)(nickel sulfate) affin...
【基金】 国家自然科学基金(No.81402640); 湖北省自然科学基金(No.2014CFB406); 武汉市卫生计生委科研项目(No.WX15B23); 武汉市中青年医学骨干人才培养工程(No.2014-77)~~
【更新日期】 2017-01-05
【分类号】 R383.24
【正文快照】 日本血吸虫(Schistosoma japonicum)相对分子质量(Mr)为26 000的谷胱甘肽-S-转移酶(Sj26GST)是WHO推荐的疫苗候选分子之一[1]。Sj26GST是血吸虫生理功能所需的重要解毒酶,对血吸虫的正常生理发挥着重要的作用,主要存在于血吸虫成虫和童虫的实质中[2]。重组r Sj26GST不仅具有谷?

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