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新城疫病毒HBNU/LSRC/F3株HN基因真核表达及其编码蛋白的抗肿瘤功能研究  
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【英文篇名】 The eukaryotic expression of the hemagglutinin-neuraminidase gene of the HBNU/LSRC/F3 strain of the Newcastle disease virus and the antitumor function of the protein that gene codes for
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【作者】 李冠华; 王静; 武彩霞; 刘华; 刘进军; 刘开扬;
【英文作者】 LI Guan-hua; WANG Jing; WU Cai-xia; LIU Hua; LIU Jin-jun; LIU Kai-yang; Life Science Research Center; Hebei North University;
【作者单位】 河北北方学院生命科学研究中心;
【文献出处】 中国病原生物学杂志 , Journal of Pathogen Biology, 编辑部邮箱 2016年 10期  
期刊荣誉:中文核心期刊要目总览  ASPT来源刊  CJFD收录刊
【中文关键词】 HN蛋白; 真核表达; 抗肿瘤;
【英文关键词】 HN protein; eukaryotic expression; antitumor;
【摘要】 目的在人食管癌ECA109细胞中表达新城疫病毒HBNU/LSRC/F3株HN基因,观察其编码蛋白的抗肿瘤特性。方法提取新城疫病毒总RNA,以根据HN基因开放阅读框(登录号为KC246549.1)和真核表达载体C-flag pcDNA3的多克隆位点设计的带酶切位点引物通过逆转录PCR(RT-PCR)扩增HN基因,然后连接到真核表达载体上,测序正确的重组质粒转染ECA109细胞,运用免疫荧光及RT-PCR检验HN基因的表达,通过流式细胞术检测其表达产物的抗肿瘤效果。结果 HN基因正确连接到真核表达载体C-flag pcDNA3上,测序显示HN基因序列与GenBank上已发表的HBNU/LSRC/F3株的HN序列一致。重组质粒转染ECA109细胞36h后,其胞质内可见黄绿色荧光,转染48h后扩增到HN基因,而空质粒转染细胞扩增阴性。经流式细胞术检测,重组质粒转化肿瘤细胞凋亡率为(8.2±1.56)%,空质粒对照组为(4.6±0.83)%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 HN基因重组质粒转化ECA109细胞表达HN蛋白,该蛋白具有一定的抗肿瘤活性。
【英文摘要】 Objective In order to explore the antitumor properties of the HN gene of the HBNU/LSRC/F3 strain of the Newcastle disease virus(NDV),the HN gene was cloned and expressed in human esophageal cancer ECA109 cells.Methods The total RNA of NDV was extracted,primers were designed in accordance with the open reading frame(accession number:KC246549.1)of the HN gene and multiple cloning sites of the eukaryotic expression vector C-flag pcDNA3.The HN gene was amplified with reverse transcription PCR(RT-PCR),ligated in...
【基金】 河北省自然科学基金项目(No.H2014405044); 河北北方学院创新人才培育项目(No.CXRC1318)
【更新日期】 2016-11-03
【分类号】 R373
【正文快照】 ***当某种病毒可以杀死体内或体外培养的肿瘤细胞时,这种病毒被称为溶瘤病毒。溶瘤病毒的基因组分为DNA和RNA两种,满足溶瘤病毒的首要条件为人类非致病性,比如新城疫病毒(Newcastle disease vi-rus,NDV)[1]。新城疫病毒属于副黏病毒科,副黏病毒亚科,腮腺炎病毒属禽副黏病毒I型(

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