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奶牛MC4R基因真核表达载体的构建及其表达定位
【摘要】 奶牛黑素皮质素受体-4(MC4R)基因作为G蛋白偶联受体,是关系经济性状的重要候选基因。本研究从牛基因组中克隆得到MC4R基因的编码序列,将克隆片段与pc DNA3.1真核表达载体进行KpnⅠ和EcoRⅠ双酶切,连接形成重组表达载体,将载体瞬时转染到L02肝脏细胞,采用免疫荧光对细胞进行标记,通过激光共聚焦显微镜观察荧光活性,结果发现克隆的MC4R基因序列长度大约1 000 bp,成功构建真核表达载体MC4R-3.1,将载体转染肝脏细胞后Western blot检测蛋白表达,经过激光共聚焦观察荧光后发现MC4R蛋白的绿色荧光在细胞膜上有正常表达,可为进一步研究MC4R受体基因功能提供参考。
【基金】 河南省基础与前沿项目(162300410258);河南省高等学校重点科研项目(15A230020);河南省教育厅科学技术研究重点项目(14A230013)
- 【文献出处】 畜牧与兽医 ,Animal Husbandry & Veterinary Medicine , 编辑部邮箱 ,2016年07期
- 【分类号】S823
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