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从肺癌组织提取高纯度总RNA方法的优化及应用  
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【英文篇名】 Optimizing Method of High Quality Total RNA Isolated and Purified from Lung Cancer and Its Application
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【作者】 程斌; 钟里科; 王增; 黄萍; 陈枢青;
【英文作者】 CHENG Bin; ZHONG Like; WANG Zeng; HUANG Ping; CHEN Shuqing; College of Pharmaceutical Sciences; Zhejiang University; Zhejiang Cancer Hospital;
【作者单位】 浙江大学药学院; 浙江省肿瘤医院;
【文献出处】 中国现代应用药学 , Chinese Journal of Modern Applied Pharmacy, 编辑部邮箱 2016年 05期  
期刊荣誉:中文核心期刊要目总览  ASPT来源刊  CJFD收录刊
【中文关键词】 肿瘤组织; 非小细胞肺癌; RNA提取; TRIzol法; 实时荧光定量PCR;
【英文关键词】 tumor tissue; non-small cell lung cancer; RNA extraction; TRIzol method; real-time quantitative PCR;
【摘要】 目的通过对传统TRIzol提取组织中RNA的方法进行优化,建立一种较为简便、高效、经济的提取方法,并用优化后的方法检测非小细胞肺癌组织中ERCC1、RRM1和BRCA1的m RNA表达水平。方法非小细胞肺癌的组织标本(包括肿瘤组织和正常组织)36例,采用传统和优化后的方法提取肺癌组织及正常组织中RNA,以SYBR Green荧光实时定量PCR分析各组织中ERCC1、RRM1、BRCA1以及管家基因GAPDH的m RNA表达水平。结果传统方法的RNA浓度和纯度分别为(0.76±0.07)mg·m L?1和1.87±0.04,优化方法的RNA浓度和纯度分别为(1.12±0.07)mg·m L?1和1.95±0.03;琼脂糖凝胶电泳表明RNA没有降解,各个引物的熔解曲线均呈单峰,特异性良好。实时荧光定量显示,肺癌组织中ERCC1、RRM1和BRCA1的相对m RNA表达高于正常组织;ERCC1和BRCA1在不同病理类型(腺癌、鳞癌)的肿瘤组织中表达无显著性差异,RRM1在肺鳞癌中的表达显著高于腺癌(P<0.05);不同性别中的基因表达均无显著性差异。结论相比传统方法,利用优化后的方法提取样本的总RNA浓度、纯度和完...
【英文摘要】 OBJECTIVE To develop a more simple, efficient and economical method of total RNA extracted from human non-small cell lung cancer tissues by optimization of traditional TRIzol method, and detect m RNA expression levels of ERCC1, RRM1 and BRCA1. METHODS Thirty-six samples of non-small cell lung cancer(NSCLC, including tumor tissues and normal tissues) were collected and RNA from these samples were extracted through traditional and optimized method, expression levels of ERCC1, RRM1, BRCA1 and housekeeping gene...
【基金】 浙江省医药卫生科技计划(2014KYB036)
【更新日期】 2016-06-07
【分类号】 R734.2
【正文快照】 RNA技术在肿瘤分子生物学研究中发挥着重要的作用,对某一肿瘤组织进行性状研究,首先要获得该性状基因,从肿瘤组织细胞中分离高质量的RNA是许多研究成功与否的关键,如c DNA合成、PCR等实验的成效在很大程度上取决于提取RNA的质量。RNA非常容易被内源的和外源的核酸酶特异性降解,

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