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鸭瘟病毒gB蛋白单克隆抗体的制备  
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【英文篇名】 Preparation and identification of monoclonal antibodies against gB protein of duck plague virus
【下载频次】 ★★★
【作者】 赵丹丹; 刁有祥; 杨国平; 陈浩; 提金凤; 张璐;
【英文作者】 ZHAO Dandan; DIAO Youxiang; YANG Guoping; CHEN Hao; TI Jinfeng; ZHANG Lu; College of Animal Science and Technology; Shandong Agricultural University;
【作者单位】 山东农业大学动物科技学院;
【文献出处】 西北农林科技大学学报(自然科学版) , Journal of Northwest A & F University(Natural Science Edition), 编辑部邮箱 2016年 10期  
期刊荣誉：中文核心期刊要目总览  ASPT来源刊  中国期刊方阵  CJFD收录刊
【中文关键词】 鸭瘟病毒; gB蛋白; 单克隆抗体;
【英文关键词】 duck plague virus; gB protein; monoclonal antibody;
【摘要】 【目的】制备鸭瘟病毒(DPV)gB蛋白单克隆抗体,为建立DPV快速诊断方法及进一步鉴定DPV的抗原表位奠定基础。【方法】克隆DPVgB基因,构建其表达载体并进行原核表达,纯化DPV gB蛋白,以其作为抗原免疫8周龄BALB/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,进行间接ELISA及亚克隆筛选,并对单抗亚类及抗原性进行鉴定。【结果】PCR扩增出915bp的目的基因,成功连接于pET-28a载体,并转化大肠杆菌Rosetta进行诱导表达,获得4株稳定分泌抗DPV gB蛋白的杂交瘤细胞株,分别命名为A8D7、E6C3、H11F8、H6F6,间接ELISA检测其腹水效价分别为1∶103、1∶103、1∶105、1∶103,亚类鉴定结果分别为IgG2b、IgG2a、IgG2b、IgG1,轻链均为kappa链。Western blot结果显示4株单抗均能与DPV gB蛋白特异性结合,IFA结果表明4株单抗是针对DPV产生的。【结论】成功获得了特异性针对DPV gB蛋白的单克隆抗体。
【英文摘要】 【Objective】This study prepared monoclonal antibodies against gB protein of duck plague virus to provide basis for establishing diagnosis method of DPV infection and identifying antigen epitope of DPV.【Method】The DPV gBgene was cloned to establish its expression vector and conduct prokaryotic expression.DPV gB protein was purified and used to immunize 8weeks old BALB/c mice,whose splenocytes were fused with SP2/0myeloma cells for indirect ELISA and sub-clone screening.【Result】PCR amplification obtained the a...
【基金】 国家现代农业产业技术体系项目(CARS-43)
【更新日期】 2016-10-31
【分类号】 S852.65
【正文快照】 鸭瘟由Baudet于1923年首次在荷兰发现,随后陆续在许多养鸭国家暴发和流行,给养鸭业带来严重的经济损失[1]。鸭瘟病毒(Duck Plague Virus,DPV)又名鸭病毒性肠炎病毒(Duck Enteritis Vi-rus,DEV),是引起鸭、鹅、天鹅等雁形目动物急性、热性、败血性传染病的病原[2]。近年来,鸭瘟?

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