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谷氏菌素生物合成基因gouC和gouD的功能研究  
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【英文篇名】 Functional characterization of gouC and gouD in gougerotin biosynthesis
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【作者】 韦俊宏; 张集慧; 江玲娟; 谭华荣; 牛国清;
【英文作者】 Junhong Wei; Jihui Zhang; Lingjuan Jiang; Huarong Tan; Guoqing Niu; State Key Laboratory of Silkworm Genome Biology; Southwest University; State Key Laboratory of Microbial Resources; Institute of Microbiology; Chinese Academy of Sciences;
【作者单位】 西南大学家蚕基因组生物学国家重点实验室; 中国科学院微生物研究所微生物资源前期开发国家重点实验室;
【文献出处】 微生物学报 , Acta Microbiologica Sinica, 编辑部邮箱 2016年 03期  
期刊荣誉：中文核心期刊要目总览  ASPT来源刊  中国期刊方阵  CJFD收录刊
【中文关键词】 禾粟链霉菌; 谷氏菌素; 生物合成基因簇; 功能研究; 产物鉴定;
【英文关键词】 Streptomyces graminearus; gougerotin; gene cluster; functional characterization; compound identification;
【摘要】 【目的】由于谷氏菌素产生菌禾粟链霉菌的遗传操作效率较低,本研究在谷氏菌素生物合成基因簇成功异源表达的基础上,通过在异源宿主天蓝色链霉菌M1146中阻断谷氏菌素生物合成基因gouC和gouD,研究其在谷氏菌素生物合成中的作用,为谷氏菌素生物合成途径的阐明奠定基础。【方法】以含有谷氏菌素生物合成基因簇的黏粒D6-4H为基础,通过PCR-targeting的方法分别将gouC和gouD敲除得到重组质粒p GOUe-ΔC和p GOUe-ΔD。通过接合转移将这两个重组质粒分别导入天蓝色链霉菌M1146中,获得gouC和gouD的缺失突变株M1146-GOUe-ΔC和M1146-GOUe-ΔD,通过HPLC分析突变株的谷氏菌素中间产物积累情况,分离纯化后对其进行结构鉴定和生物活性检测。【结果】gouC和gouD的缺失均导致谷氏菌素不能合成,突变株发酵液中积累了不同的中间产物,生物活性分析发现这些中间产物均失去了对肿瘤细胞的抑制活性。【结论】gouC和gouD是谷氏菌素生物合成的重要基因,与谷氏菌素肽基部分的肌氨酸残基合成相关。本研究为阐明谷氏菌素的生物合成机制提供了更多的依据。
【英文摘要】 [Objective] To determine the functions of gou C and gou D in gougerotin biosynthesis, disruption of these two genes was performed. As gougerotin producing strain Streptomyces graminearus lacks efficient genetic manipulation system, the gene cluster for gougerotin biosynthesis was heterologously expressed in Streptomyces coelicolor M1146 to facilitate genetic manipulations of gou C and gou D. [Methods] By using fosmid D6-4H containing the complete gougerotin biosynthetic gene cluster, gou C and gou D were di...
【基金】 国家“973计划”(2015CB150600); 国家自然科学基金(31270110,31571281)~~
【更新日期】 2016-03-16
【分类号】 Q78
【正文快照】 谷氏菌素属于核苷肽类抗生素,具有抗肿瘤、抗病毒、抗支原体、驱虫与杀螨等生物活性[1–4],是一种具有开发价值的农用与医用抗生素,其产生菌主要包括谷氏链霉菌(Streptomyces gougerotii)和禾粟链霉菌(Streptomyces graminearus)[5–6]。谷氏菌素是蛋白质合成的抑制剂[7],通过?

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