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地高辛标记DNA探针杂交法检测Vero细胞DNA残留量的适用性验证及应用  
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【英文篇名】 Applicability validation and application of Digoxigenin-labeled DNA probe in detection of residual DNA by hybridization in Vero cell
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【作者】 孙小慧; 刘晓凡; 赵雅静; 马超; 刘鹏; 冯德杰; 李薇; 魏然; 王革;
【英文作者】 SUN Xiao-hui; LIU Xiao-fan; ZHAO Ya-jing; MA Chao; LIU Peng; FENG De-jie; LI Wei; WEI Ran; WANG Ge; Department of Quality Control; Lanzhou Institute of Biological Products Co.; Ltd.; Center for Gansu Provincial Vaccine Engineering Research;
【作者单位】 兰州生物制品研究所有限责任公司质量检定室甘肃省疫苗工程技术研究中心;
【文献出处】 微生物学免疫学进展 , Progress in Microbiology and Immunology, 编辑部邮箱 2016年 02期  
期刊荣誉:ASPT来源刊  CJFD收录刊
【中文关键词】 地高辛; DNA探针; 斑点杂交; Vero细胞; DNA残留量;
【英文关键词】 Digoxigenin; DNA probe; Dot hybridization; Vero cell; Residual DNA quantity;
【摘要】 目的对地高辛标记DNA探针杂交法检测人用狂犬病疫苗(Vero细胞)DNA残留量进行适用性验证及应用。方法对地高辛标记DNA探针杂交法检测人用狂犬病疫苗(Vero细胞)DNA残留量进行特异性、灵敏度及稳定性验证,并应用该方法检测3批人用狂犬病疫苗(Vero细胞)的DNA残留量。结果地高辛标记探针的标记效率为0.1 pg。验证结果显示探针与非同源DNA无杂交;最低检测限度为1 pg;探针在-20℃放置7个月后,检测灵敏度仍可达到1 pg;3批人用狂犬病疫苗(Vero细胞)中残留DNA含量均符合《中国药典》规定质量控制标准。结论地高辛标记DNA探针杂交法特异性、灵敏度好,结果稳定,适用于人用狂犬病疫苗(Vero细胞)中Vero细胞DNA残留量的检测及疫苗生产过程和其成品的质量控制,对其他以Vero细胞为基质的病毒性疫苗质量控制具有借鉴意义。
【英文摘要】 Objective Objective To detect the residual DNA quantity in Vero cell contained in rabies vaccine( Vero cell)for human use( simplified as rabies vaccine) by Digoxigenin-labeled DNA probe,and the applicability of the method was verified and applied. Methods The Digoxigenin-labeled DNA probe was carried out in verification of the specificity,sensitivity,repeatability and stability for detecting the residual DNA quantity in Vero cell contained in rabies vaccine,and the method was applied to detect residual DNA ...
【更新日期】 2016-04-19
【分类号】 R392-33
【正文快照】 Vero细胞是世界卫生组织(World Health Or-ganization,WHO)推荐使用制备人用疫苗的培养基质,该传代细胞系,生长快、易培养,并在规模化病毒培养(生物反应器)中显现出极大的优势,解决了病毒性疫苗规模化生产的瓶颈。Vero细胞DNA具有潜在的致瘤性[1-2],因此,以Vero细胞为基质的疫?

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