肠道病毒71型抗原ELISA定量检测方法的建立及应用-中国学术期刊网络出版总库

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肠道病毒71型抗原ELISA定量检测方法的建立及应用

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【英文篇名】	Establishment and application of a quantitative ELISA for enterovirus 71 antigen
【下载频次】	★★★★★
【作者】	陈晓琦; 王继麟; 季雅琦; 郭长福; 杨明; 游磊; 叶程; 肖慧; 明平刚; 张海峰; 李月影; 王泽鋆; 李秀玲; 申硕;
【英文作者】	CHEN Xiao-qi; WANG Ji-lin; JI Ya-qi; GUO Chang-fu; YANG Ming; YOU Lei; YE Cheng; XIAO Hui; MING Ping-gang; ZHANG Hai-feng; LI Yue-ying; WANG Ze-jun; LI Xiu-ling; SHEN Shuo; Department of Enterovirus Vaccine; Wuhan Institute of Biological Products Co.; Ltd.;
【作者单位】	武汉生物制品研究所有限责任公司肠道病毒疫苗室; 北京生物制品研究所有限责任公司;
【文献出处】	微生物学免疫学进展 , Progress in Microbiology and Immunology, 编辑部邮箱 2016年 01期期刊荣誉：ASPT来源刊 CJFD收录刊
【中文关键词】	肠道病毒71型; 抗原; 定量; 酶联免疫吸附试验; 手足口病;
【英文关键词】	Enterovirus 71; Antigen; Quantification; ELISA; Hand; foot and mouth disease(HFMD);
【摘要】	目的建立肠道病毒71型(EV71)抗原ELISA定量检测方法,用于EV71疫苗生产工艺中抗原定量检测。方法选取抗EV71单克隆抗体作为包被抗体,HRP标记抗EV71多克隆抗体作为酶标二抗,建立EV71抗原ELISA定量检测方法。该方法经系统验证后,应用于定量检测2BS及Vero细胞基质EV71疫苗生产工艺过程样品的抗原含量。结果验证结果显示,该方法的线性范围为3.125~50.000 U/m L,样品回收率为92.0%~110.0%,变异系数小于8.8%;孵育时间及温度在一定范围内偏差的样品回收率为100.8%~113.8%;检测其他肠道病毒中抗原其A值均小于cut-off值;试剂于37℃孵育3 d后的检测样品回收率为101.4%~112.4%;2BS及Vero细胞基质EV71疫苗生产工艺过程样品的适用性检测中,抗原回收率为92.1%~114.9%。结论建立并验证EV71抗原ELISA定量检测方法,其准确度、精密度、耐用性均优良,特异性强、稳定性好,适用于不同细胞基质的EV71疫苗及多价手足口病疫苗生产工艺过程的质量控制。
【英文摘要】	Objective To develop a quantitative ELISA for monitoring the manufacturing process of enterovirus 71 vaccine.Methods A double antibody sandwich ELISA was developed by using a monoclonal antibody against EV71 as capture antibody and a HRP conjugated rabbit against EV71 antibody as detecting antibody. The ELISA kit was tested for linear range and validated for accuracy,precision,specificity,robustness and stability. The EV71 antigen yields were determined by the ELISA in tested samples in preparation of bulk ...
【基金】	国家科技重大专项“重大新药创制”课题(2013ZX09402-302); 武汉市2013年高新技术成果转化及产业化项目(2013060803010394); 卫计委的重大新药创制课题(2015ZX09102021)
【更新日期】	2016-01-05
【分类号】	R512.5
【正文快照】	肠道病毒71型(EV71)是导致手足口病(HFMD)和疱疹性咽峡炎的主要病原体,主要临床表现为发热以及手、足、口腔等部位的皮疹或疱疹,少数重症患者出现脑膜炎、脑炎、脑脊髓炎等;极少数患者病情危重,可致死亡。中国2008年将HFMD列为法定丙类传染病管理。中国于2014年报告手足口病发?

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