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小鼠血清中Hia荚膜多糖特异IgG含量间接ELISA检测方法的建立及验证  
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【英文篇名】 Establishment and validation of an indirect ELISA method for determination of Haemophilus influenzae type a capsular polysaccharide specific IgG content in mouse sera
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【作者】 苗鑫; 王欣茹; 赵志强; 刘佳; 刘月萍; 刘方蕾; 李燕婷; 戈钰雯; 谢贵林; 谭小梅;
【英文作者】 MIAO Xin; WANG Xin-ru; ZHAO Zhi-qiang; LIU Jia; LIU Yue-ping; LIU Fang-lei; LI Yan-ting; GE Yu-wen; XIE Gui-lin; TAN Xiao-mei; Lanzhou Institute of Biological Products Co.; Ltd.; Vaccine Engineering Technology Center of Gansu Province;
【作者单位】 兰州生物制品研究所有限责任公司甘肃省疫苗工程技术研究中心;
【文献出处】 中国生物制品学杂志 , Chinese Journal of Biologicals, 编辑部邮箱 2016年 11期  
期刊荣誉:ASPT来源刊  CJFD收录刊
【中文关键词】 a型流感嗜血杆菌; 荚膜多糖; 免疫球蛋白G; 酶联免疫吸附试验;
【英文关键词】 Haemophilus influenzae type a(Hia); Capsular polysaccharide; Immunoglobulin G; Enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA);
【摘要】 目的建立间接ELISA方法检测小鼠血清中a型流感嗜血杆菌(Haemophilus influenzae type a,Hia)荚膜多糖(capsular polysaccharide,CPS)特异IgG含量,并对该方法进行验证。方法用1-氰基-4-二甲基氨基吡啶-四氟硼酸盐(1-cyano-4-dimethylaminopyridinium tetrafluoroborate,CDAP)活化Hia CPS制备酪胺化荚膜多糖(capsular polysaccharide-tyramined,CPS-Tyr),经Sepharose CL-4B层析柱分析其与Hia CPS的相对分子质量分布范围;对包被条件、封闭条件及显色时间进行优化,以碱性磷酸酶标记的羊抗鼠Ig G作为二抗,4-硝基苯磷酸二钠盐作为显色剂,建立小鼠血清中Hia CPS抗体的间接ELISA检测方法,并对该方法的特异性、线性及精密度进行验证。结果 CPS-Tyr与CPS相比,相对分子质量分布未发生明显变化。优化后的检测条件:包被抗原为CPS-Tyr,包被浓度为5μg/ml;以Costar42592为检测酶标板;含1%(bovine serum alb...
【英文摘要】 Objective To establish and validate an indirect ELISA method for determination of Haemophilus influenzae type a(Hia) capsular polysaccharide(CPS)-specific IgG content in mouse sera. Methods Capsular polysaccharidetyramined(CPS-Tyr) was prepared by activation of Hia CPS with 1-cyano-4-dimethylaminopyridiniumtetrafluoroborate(CDAP). The distributions of relative molecular masses of CPS-Tyr and Hia CPS were analyzed by Sepharose CL-4B chromatography. The conditions for coating and blocking as well as time for ...
【更新日期】 2016-11-25
【分类号】 R392-33
【正文快照】 b型流感嗜血杆菌(Haemophilus influenzae typeb,Hib)结合疫苗广泛应用后,全世界侵袭性Hib疾病的发病率降低了90%以上[1-2],但a型流感嗜血杆菌(Haemophilus influenzae type a,Hia)疾病的发病率却显著升高,尤以北美本土儿童发病率升高更为明显,并且在美国阿拉斯加州曾经发生2次

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