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A群C群脑膜炎球菌结合疫苗游离蛋白含量HPLC检测方法的建立  
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【英文篇名】 Development of a HPLC method for determination of free protein content in groups A & C meningococcal polysaccharide conjugate vaccine
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【作者】 刘璐; 蔡峰; 王公孝; 王学林; 许蓉华; 熊慧玲;
【英文作者】 LIU Lu; CAI Feng; WANG Gong-xiao; WANG Xue-lin; XU Rong-hua; XIONG Hui-ling; Chengdu Institute of Biological Products Co.; Ltd.;
【作者单位】 成都生物制品研究所有限责任公司;
【文献出处】 中国生物制品学杂志 , Chinese Journal of Biologicals, 编辑部邮箱 2016年 11期  
期刊荣誉：ASPT来源刊  CJFD收录刊
【中文关键词】 A群C群脑膜炎球菌结合疫苗; 高效液相色谱法; 游离蛋白; 含量测定;
【英文关键词】 Groups A & C meningococcal polysaccharide conjugate vaccine; High performance liquid chromatography(HPLC); Free protein; Content determination;
【摘要】 目的建立A群C群脑膜炎球菌结合疫苗中游离蛋白含量的HPLC检测方法,并对其进行验证。方法采用HPLC法,色谱条件:色谱柱:TSKgel G3000SW(300 mm×7.5 mm,10μm);流动相:0.01 mol/L磷酸盐缓冲液[pH(7.2±0.2)];流速:0.5 ml/min,自动进样100μl;检测波长:280 nm;柱温:室温。对该方法进行专属性、分离度、线性、精密性和准确性验证,确定该方法的定量限和检测限;应用建立的方法检测3批A、C群脑膜炎球菌结合疫苗原液及A群C群脑膜炎球菌结合疫苗成品中游离蛋白含量。结果该方法检测游离蛋白的专属性、分离度良好;蛋白对照品在3~18μg/ml范围内,标准曲线的线性关系良好,R~2=0.998;3批A、C群脑膜炎球菌结合疫苗原液、A群C群脑膜炎球菌结合疫苗成品的加样回收率在82.9%~119.33%之间,RSD小于5%;确定方法检测限为1.0μg/ml,定量限为2.6μg/ml。3批A、C群脑膜炎球菌结合疫苗原液和A群C群脑膜炎球菌结合疫苗成品未检测出游离蛋白。结论建立的HPLC法简便、灵敏、准确度高,可检测A群C群脑膜炎球菌结合疫苗中游离蛋白含量。
【英文摘要】 Objective To develop and verify a HPLC method for determination of free protein content in groups A & C meningococcal polysaccharide conjugate vaccine. Methods The free protein content in groups A & C meningococcal polysaccharide conjugate vaccine was determined by HPLC on TSKgel G3000 SW column(300 mm × 7. 5 mm, 10 μm),using 0. 01 mol / L phosphate buffered saline as mobile phase at a flow rate of 0. 5 ml / min. The sample load, detection wavelength and column temperature were 100 μl, 280 nm and room tempe...
【更新日期】 2016-11-25
【分类号】 R392-33
【正文快照】 流行性脑脊髓膜炎(Neisseria meningitides)(以下简称流脑)是由奈瑟脑膜炎球菌引起的一种严重 危害人类健康的急性呼吸道传染病,是引起人类发病和死亡的重要原因之一[1-2]。在全球范围内,A、B、C、Y和W135群脑膜炎球菌感染占所有感染者的 90%以上[3],我国以A群和C群为主[4],2

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