中国学术期刊网络出版总库
  关闭
重组腺病毒载体pAd-4-hMASP-2的构建  
   推荐 CAJ下载 PDF下载
【英文篇名】 Construction of recombinant adenovirus vector pAd-4-hMASP-2
【下载频次】 ★★★☆
【作者】 张国超; 雒艳萍; 陆小铃; 王倩; 董信芳; 曹明强; 于红娟; 马兴铭;
【英文作者】 ZHANG Guo-chao; LUO Yan-ping; LU Xiao-ling; WANG Qian; DONG Xin-fang; CAO Ming-qiang; YU Hong-juan; MA Xing-ming; School of Basic Medical Sciences; Lanzhou University;
【作者单位】 兰州大学基础医学院; 甘肃省新药临床前重点实验室;
【文献出处】 中国生物制品学杂志 , Chinese Journal of Biologicals, 编辑部邮箱 2016年 11期  
期刊荣誉:中文核心期刊要目总览  ASPT来源刊  CJFD收录刊
【中文关键词】 甘露糖凝集素相关丝氨酸蛋白酶-2; 同源重组; 腺病毒;
【英文关键词】 Human mannan-binding lectin associated serine protease 2(hMASP-2); Homologous recombination; Adenovirus;
【摘要】 目的利用p Yr-adshuttle-4质粒构建重组腺病毒载体p Ad-4-h MASP-2。方法应用PCR技术扩增甘露糖凝集素相关丝氨酸蛋白酶-2(human mannan-binding lectin associated serine protease-2,h MASP-2)基因,经Bam HⅠ和Eco RⅠ双酶切后与p Yr-adshuttle-4质粒连接,构建穿梭质粒p Yr-ads-4-h MASP-2,在LR酶作用下与腺病毒骨架载体p Ad/PL-DEST进行体外同源重组,获得重组腺病毒载体p Ad-4-h MASP-2,转染HEK293细胞,获得重组腺病毒r Adh MASP-2,应用酶切、PCR扩增及基因测序进行鉴定,并测定病毒滴度。将r Ad-h MASP-2感染小鼠,实时荧光定量PCR法检测h MASP-2基因m RNA在小鼠肺组织中的表达。结果重组穿梭质粒p Yr-ads-4-h MASP-2经双酶切及测序证实构建正确,通过同源重组获得了重组腺病毒载体p Ad-4-h MASP-2,扩增出滴度为1.5×109 PFU/ml的重组腺病毒颗粒r Ad-h MASP-2,其能在小鼠肺组织中表...
【英文摘要】 Objective To construct recombinant adenovirus vector p Ad-4-h MASP-2 by using p Yr-adshuttle-4. Methods Human mannan-binding lectin associated serine protease-2(h MASP-2)gene was amplified by PCR, digested with Bam HⅡand Eco RⅡ, and inserted into plasmid p Yr-adshuttle-4. The constructed shuttle plasmid p Yr-ads-4-h MASP-2 and p Ad /PL-DEST adenovirus backbone vector was reconstructed through homologous recombination in mediation of LR enzyme.The obtained plasmid p Ad-4-h MASP-2 was transfected to HEK293 ce...
【基金】 国家自然科学基金项目(31370912); 兰州大学中央高校基本科研业务费专项资金(lzujbky-2014-146)资助
【更新日期】 2016-11-25
【分类号】 R346
【正文快照】 补体系统是脊椎动物特有的一种血浆蛋白水解级联系统,是机体抵御入侵病原体的第一道免疫防线。多功能域的丝氨酸蛋白酶是该系统的核心部分,其最初是以酶原的形式存在,并通过类似级联反 应的过程相互活化[1]。补体系统主要通过经典、旁路和凝集素3种途径被激活,其中甘露糖结合?

xxx
【读者推荐文章】中国期刊全文数据库 中国博士学位论文全文数据库 中国优秀硕士学位论文全文数据库
【相似文献】
中国期刊全文数据库
中国优秀硕士学位论文全文数据库
中国博士学位论文全文数据库
中国重要会议论文全文数据库
中国重要报纸全文数据库
中国学术期刊网络出版总库
点击下列相关研究机构和相关文献作者,可以直接查到这些机构和作者被《中国知识资源总库》收录的其它文献,使您全面了解该机构和该作者的研究动态和历史。
  
 
  CNKI系列数据库编辑出版及版权所有:中国学术期刊(光盘版)电子杂志社
中国知网技术服务及网站系统软件版权所有:清华同方知网(北京)技术有限公司
其它数据库版权所有:各数据库编辑出版单位(见各库版权信息)
京ICP证040431号    互联网出版许可证 新出网证(京)字008号