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指状青霉cyt b_5和cyt b_5r基因克隆及与cyp51A的共表达  
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【英文篇名】 Cloning of Gene cyt b_5 and cyt b_5r and Their Co-expression with cyp51A in Penicillium digitatum
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【作者】 秦婷婷; 耿辉; 王胜强; 牛玉慧; 伍志; 刘德立;
【英文作者】 QIN Ting-ting; GENG Hui; WANG Sheng-qiang; NIU Yu-hui; WU Zhi; LIU De-li; Hubei Key Laboratory of Genetic Regulation and Integrative Biology; School of Life Sciences; Central China Normal University;
【作者单位】 华中师范大学生命科学学院湖北省遗传调控与整合生物学重点实验室;
【文献出处】 生物技术通报 , Biotechnology Bulletin, 编辑部邮箱 2016年 09期  
期刊荣誉：中文核心期刊要目总览  ASPT来源刊  CJFD收录刊
【中文关键词】 指状青霉CYP51A; 共表达; 细胞色素b5; 细胞色素b5还原酶; 毕赤酵母X-33;
【英文关键词】 Penicillium digitatum CYP51A; co-expression; cytochrome b5; cytochrome b5 reductase; Pichia pastoris X-33;
【摘要】 为探究指状青霉细胞色素b5(Cyt b5)与细胞色素b5还原酶(Cyt b5r)在细胞色素P450 CYP51A电子传递方面的功用,研究了指状青霉CYP51A与Cyt b5-Cyt b5r共表达机制;并检测了其对于cyp51A基因表达水平的影响。通过转录组分析筛选并PCR克隆获得了cyt b5与cyt b5r基因,分别命名为HS-Pdcyt b5和HS-Pdcyt b5r。以多基因串联克隆载体p PICZαA为骨架构建了指状青霉共表达质粒ppbr A(p PIC-Pdcyp51A-cyt b5-cyt b5r);电转化法将重组质粒ppbr A导入毕赤酵母X-33中。q RT-PCR分析结果显示,CYP51A与Cyt b5-Cyt b5r共表达后,其基因表达水平升高54%-97%,并维持较长时间(48-72 h)。表明Cyt b5-Cyt b5r系统可将电子高效转移给CYP51A,从而增强cyp51A基因的转录表达。从指状青霉中克隆表达HS-Pd Cyt b5和HS-Pd Cyt b5r蛋白,并通过共表达的方式研究cyp51A基因的功能尚为首次报道。
【英文摘要】 In order to investigate the role of Cytochrome b5(Cyt b5)and Cytochrome b5 reductase(Cyt b5r)in the electron transport ofcytochrome P450 CYP51 A in Penicillium digitatum,the co-expression mechanism of CYP51 A and Cyt b5-Cyt b5 r in P. digitatum was studied,and its effects on the expression of gene cyp51 A was detected. By analyzing and screening transcriptome as well as PCR cloning,gene cyt b5 andcyt b5 r were acquired and designated as HS-Pdcyt b5 and HS-Pdcyt b5 r. Further,a co-expressed plasmid vector pp...
【基金】 国家自然科学基金项目(31371893,31071653)
【更新日期】 2016-10-21
【分类号】 Q78
【正文快照】 细胞色素P450 CYP51又名甾醇14-α-去甲基化酶(Sterol 14α-demethylase),是唯一广泛存在于动物、植物、真菌、细菌中的细胞色素P450家族成员,也是抗真菌剂、除草剂以及降胆固醇药物的重要靶标酶。Sanborn和Williams[1]首次从伞树科蚕幼虫中检测到细胞色素b5(Cyt b5)。Cyt b5是

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