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大肠杆菌yfiF基因原核表达系统构建、表达条件优化及蛋白纯化  
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【英文篇名】 Construction of the prokaryotic expression system of yfiF gene in E. coli,optimization of its induced expression condition and purification of the protein
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【作者】 张树军; 狄建军; 张国文;
【英文作者】 Shujun Zhang; Jianjun Di; Guowen Zhang; School of Life Science; Inner Mongolia University; College of Life Science; Inner Mongolia University for Nationalities;
【作者单位】 内蒙古大学生命科学学院; 内蒙古民族大学生命科学学院;
【文献出处】 生物技术 , Biotechnology, 编辑部邮箱 2016年 03期  
期刊荣誉:ASPT来源刊  CJFD收录刊
【中文关键词】 yfiF基因; pET16b质粒; 原核表达; 蛋白纯化;
【英文关键词】 yfiF genes; plasmid pET16b; prokaryotic expression; protein purification;
【摘要】 [目的]构建大肠杆菌功能未知基因yfi F的原核表达系统,对诱导表达条件进行优化,并纯化表达的可溶性Yfi F融合蛋白。[方法]使用p ET16b表达质粒构建p ET16b-yfi F原核表达载体,转化大肠杆菌BL21,IPTG诱导表达Yfi F融合蛋白,对IPTG加入时机、终浓度及诱导时间进行优化,并使用镍柱纯化裂菌上清液中的可溶性Yfi F融合蛋白。[结果]构建了p ET16b-yfi F重组质粒,IPTG诱导表达Yfi F融合蛋白,最佳诱导条件为细菌生长至OD600值为1时加入IPTG,终浓度为0.1 mmol/L,诱导9 h。裂菌上清液中的可溶性Yfi F融合蛋白纯化后浓度为209μg/ml。[结论]成功构建了yfi F的原核表达系统,优化了诱导表达条件,可溶性Yfi F融合蛋白得到纯化。
【英文摘要】 [Objective]To construct the prokaryotic expression system of yfi F gene,which is a function unknown gene of E. coli,to optimize its induced expression condition,and to purify the soluble Yfi F fusion protein. [Methods]Using p ET16 b expression plasmid to construct p ET16b- yfi F prokaryotic expression vector,then transformed it into E. coli BL21,and was induced by IPTG to express fusion protein Yfi F. The adding time,final concentration and induction time of IPTG was optimized. The soluble Yfi F fusion prot...
【更新日期】 2016-07-21
【分类号】 Q78
【正文快照】 大肠杆菌细胞的拟核有1个DNA分子,长度约为4.7 Mbp,在DNA分子上分布着大约4 400个基因,每个基因的平均长度约为1 000 bp。随着研究的不断深入,很多基因的功能和作用机制已经明确,但是仍然有一些基因的功能和作用机制还不清楚。大肠杆菌yfi F基因是一个功能未知的基因,它所编码?

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