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Neurexin 1β及其剪切变异体真核表达载体构建  
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【英文篇名】 Construction of Neurexin 1β and its splice variant eukaryotic expression plasmid vector
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【作者】 徐岩; 侯筱宇;
【英文作者】 Yan Xu; Xiaoyu Hou; Jiangsu Key Laboratory of Brain Disease Bioinformation; Research Center for Biochemistry and Molecular Biology; Xuzhou Medical College;
【作者单位】 徐州医学院江苏省脑病生物信息重点实验室生物化学与分子生物学研究中心;
【文献出处】 生物技术 , Biotechnology, 编辑部邮箱 2016年 01期  
期刊荣誉:ASPT来源刊  CJFD收录刊
【中文关键词】 Neurexin 1β; 剪切变异体; 真核表达载体; 蛋白表达;
【英文关键词】 Neurexin 1β; splice variant; eukaryotic expression vector; protein expression;
【摘要】 [目的]构建大鼠Neurexin 1β(Nrx 1β)及其剪切变异体Nrx 1β(ΔS4)真核表达载体,并鉴定其在真核细胞中的表达能力。[方法]以提取的大鼠海马总RNA为模板,采用RT-PCR技术获得Nrx 1β及Nrx 1β(ΔS4)目的基因,通过分子生物学方法将目的基因亚克隆至p DsRed2-C1载体。重组体转染HEK293T细胞,免疫印迹检测Nrx 1β及Nrx1β(ΔS4)的蛋白表达。[结果]Nrx 1β及Nrx 1β(ΔS4)目的基因扩增成功,重组体酶切鉴定能观察到目的基因片段(约1500 bp处),Nrx 1β及Nrx 1β(ΔS4)测序结果与Gen Bank中的序列一致。免疫印迹显示,p DsRed2-C1-Myc-Nrx 1β或p DsRed2-C1-Myc-Nrx 1β(ΔS4)在HEK293T细胞中能表达Nrx 1β或Nrx 1β(ΔS4)。[结论]成功构建大鼠Nrx1β及其剪切变异体Nrx 1β(ΔS4)的真核表达载体,重组体在HEK293T细胞中高效表达。
【英文摘要】 [Objective]To construct the recombinant of rat Neurexin 1β( Nrx 1β) and its splice variant eukaryotic expression plasmid Nrx 1β(ΔS4),and to identify their expression ability in eukaryotic cells. [Methods]Target genes of Nrx 1β and Nrx1β(ΔS4) were expanded by RT- PCR using rat hippocampal total RNA as template. Then the target genes were sub- cloned into the p DsRed2- C1 vector by molecular biology method. The recombinants were transfected into HEK293 T cells,and protein expression was detected by Western Bl...
【基金】 国家自然科学基金项目(“脑缺血PSD-95酪氨酸磷酸化对突触后Src信号网络的调控”,No.81173030); 江苏省高校优势学科建设工程资助项目(PAPD)资助
【更新日期】 2016-04-11
【分类号】 Q78
【正文快照】 在脊椎动物的大脑中,神经元之间由数万亿的连接构成中枢神经系统网络。神经元发挥正常的功能需要形成适当的,大量的神经连接,这主要依赖于神经粘附分子(neural cell adhesion molecule,NCAM)的存在。NCAM是细胞表面的一种糖蛋白,在神经元发育中,NCAM参与神经元之间相互粘附,促?

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