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荧光PCR和数字PCR法检测转基因DAS-44406-6品系大豆  
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【英文篇名】 Detection of Genetically Modified Soybean Event DAS-44406-6 by Real-Time PCR Method and Digital PCR Method
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【作者】 于晓帆; 高宏伟; 孙?敏; 肖西志; 李荣贵;
【英文作者】 YU Xiaofan; GAO Hongwei; SUN Min; XIAO Xizhi; LI Ronggui; College of Life Sciences; Qingdao University; Center of Inspection and Quarantine Technology; Shandong Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau;
【作者单位】 青岛大学生命科学学院; 山东出入境检验检疫局检验检疫技术中心;
【文献出处】 食品科学 , Food Science, 编辑部邮箱 2016年 16期  
期刊荣誉：中文核心期刊要目总览  ASPT来源刊  中国期刊方阵  CJFD收录刊
【中文关键词】 转基因大豆; DAS-44406-6品系; 品系鉴定; 实时荧光PCR; 数字PCR;
【英文关键词】 genetically modified soybean; DAS-44406-6 event; event-specific detection; real-time PCR; digital PCR;
【摘要】 目的:建立实时荧光聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)检测转基因DAS-44406-6品系大豆的定性检测方法和使用数字PCR检测转基因DAS-44406-6品系大豆的定量检测方法。方法:针对转基因DAS-44406-6大豆品系,进行5’-RACE,测定该品系转基因大豆外源片段与大豆染色体重组的边界序列,并根据该边界序列设计引物和探针。使用23种非DAS-44406-6品系转基因植物作为阴性对照测试实时荧光PCR引物和探针的特异性,以DAS-44406-6品系样品制备6个含量梯度的样品进行检测低限实验。使用数字PCR技术进行定量检测,并确定定量检测的低限。结果:建立的转基因DAS-44406-6大豆品系的实时荧光PCR特异性检测方法品系鉴定特异性较强,实时荧光PCR检测方法的检测低限在模板DNA浓度为100 ng/反应时,为0.01%的转基因大豆含量,约为16.6个拷贝的DAS-44406-6基因组DNA;数字PCR检测方法的检测低限在模板DNA浓度为0.5 ng/反应、转基因大豆含量为1%时,相对标准偏差为0.7%。因此,建立的转基因DAS-44406-6大豆品系实时荧...
【英文摘要】 Purpose: To determine the flanking sequence between exogenous and endogenous fragments using rapid amplification of c DNA ends(5'-RACE) and consequently to examine genetically modified soybean(GMS) DAS-44406-6. Methods: Specific primers and probes were designed based on the flanking sequences of exogenous fragments of DAS-44406-6. The specificity of the developed method was validated by using it to detect a variety of other GM samples and nonGM samples. DAS-44406-6 was used to prepare 6 content gradients to...
【基金】 公益性行业(质检)科研专项(201410014)
【更新日期】 2016-08-31
【分类号】 S565.1
【正文快照】 引文格式:于晓帆,高宏伟,孙敏,等.荧光PCR和数字PCR法检测转基因DAS-44406-6品系大豆[J].食品科学,2016,37(16):235-241.DOI:10.7506/spkx1002-6630-201616038.http://www.spkx.net.cnYU Xiaofan,GAO Hongwei,SUN Min,et al.Detection of genetically modified soybean event D

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