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NDM-1阳性细菌实时荧光LAMP方法的建立及应用  
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【英文篇名】 Establishment and application of real-time fluorescence LAMP for the detection of NDM-1-positive bacteria
【下载频次】 ★★★
【作者】 陈斌; 杨银梅; 钟志敏; 雷秀霞; 刘大渔; 徐邦牢;
【英文作者】 CHEN Bin; YANG Yinmei; ZHONG Zhimin; LEI Xiuxia; LIU Dayu; XU Banglao; Department of Clinical Laboratory; Guangzhou First People's Hospital; Guangzhou Medical University;
【作者单位】 广州医科大学附属广州市第一人民医院检验科;
【文献出处】 检验医学 , Laboratory Medicine, 编辑部邮箱 2016年 08期  
期刊荣誉：ASPT来源刊  CJFD收录刊
【中文关键词】 实时荧光环介导等温扩增; 新德里金属β-内酰胺酶1细菌; 快速检测;
【英文关键词】 Real-time fluorescence loop-mediated isothermal amplification; New Delhi metallo-betalactamase-1 bacteria; Rapid detection;
【摘要】 目的建立一种实时荧光环介导等温扩增(LAMP)方法快速检测新德里金属β-内酰胺酶1(NDM-1)阳性细菌。方法根据NDM-1基因序列设计4套引物并进行优化,对LAMP反应中的荧光染料SYTO-9浓度进行优化,同时考察该方法的检出限和特异性。利用本方法检测72例临床分离的多重耐药鲍曼不动杆菌。结果本研究建立的实时荧光LAMP方法,其荧光染料SYTO-9的最佳浓度为4μmol/L;63℃恒温扩增35 min可检出101拷贝/μL的标准阳性模板;特异性较好;对72例临床分离的多重耐药鲍曼不动杆菌检出的阳性率为16.7%(12/72),12株NDM-1阳性细菌经测序验证,准确率为100%。结论本研究建立的检测NDM-1阳性细菌的实时荧光LAMP方法具有快速、操作简便、特异性好、敏感性高、准确、可靠等优点,可以直观、实时地观察反应的进行情况,适合临床NDM-1阳性细菌的快速检测。
【英文摘要】 Objective To establish a real-time fl uorescence loop-mediated isothermal amplifi cation(LAMP)for the detection of New Delhi metallo-beta-lactamase-1(NDM-1)-positive bacteria. Methods According to the sequence of NDM-1 gene,4 primers and fl uorescent dye concentration of SYTO-9 were designed and optimized,and the limit of detection and specifi city were also evaluated. A total of 72 isolates of multidrug-resistant Acinetobacter baumannii were detected. Results The optimal fl uorescent dye concentration of t...
【基金】 国家自然科学基金项目(81201163); 广东省医学科研基金项目(B2014341); 广东省自然科学基金项目(2014A030313677)
【更新日期】 2016-09-21
【分类号】 R440
【正文快照】 “超级细菌”是一类能产生新德里金属β-内酰胺酶1(New Delhi metallo-beta-lactamase-1,NDM-1)的细菌。NDM-1阳性细菌对所有β-内酰胺酶类(包括碳青霉烯类)药物耐药,仅对替加环素、黏菌素等个别抗菌药物敏感,且可借助质粒实现菌种之间的水平传播[1-3]。NDM-1阳性细菌的出现,表

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