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水稻转基因系CX8621中Xa21的整合和表达  
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【英文篇名】 Integration and expression of Xa21 in transgenic rice CX8621
【下载频次】 ★★★★
【作者】 高利芬; 刘鹏程; 夏志辉; 赵纪莹; 史佳楠; 江光怀; 刘国振; 翟文学;
【英文作者】 Lifen Gao; Pengcheng Liu; Zhihui Xia; Jiying Zhao; Jianan Shi; Guanghuai Jiang; Guozhen Liu; Wenxue Zhai; Institute of Genetics and Developmental Biology; Chinese Academy of Sciences; Institute for System Biology; Jianghan University; College of Life Sciences; Hebei Agricultural University;
【作者单位】 中国科学院遗传与发育生物学研究所; 江汉大学系统生物学研究院; 河北农业大学生命科学学院;
【文献出处】 生物工程学报 , Chinese Journal of Biotechnology, 编辑部邮箱 2016年 09期  
期刊荣誉:中文核心期刊要目总览  ASPT来源刊  CJFD收录刊
【中文关键词】 转基因水稻; Xa21; 抗白叶枯病; T-DNA整合; 表达分析;
【英文关键词】 transgenic rice; Xa21; bacteria blight resistance; T-DNA integration; expression analysis;
【摘要】 农杆菌介导的转基因技术在植物中已被广泛应用,而目的基因能否发挥功能受到多种因素的影响。前期,通过农杆菌介导的转化,实验室创制了无选择标记、无载体骨架残留的水稻转Xa21基因系CX8621。截止目前,CX8621已稳定遗传16代,依然保持着对水稻白叶枯病的优良抗性。在此基础上,本研究对外源基因Xa21在CX8621中的整合和表达情况进行了分析。首先,通过在转化载体p BXa21的左右边界与Xa21基因序列设计嵌套引物,确定Xa21被完整地整合到CX8621中。随后,利用改良的Tail-PCR方法体外克隆了整合位点的边界序列,明确了Xa21被整合在CX8621的2号染色体上。然后,通过RT-PCR分析了Xa21在CX8621中不同时期和不同组织的表达情况,结果表明Xa21在CX8621中能稳定表达,其表达量的变化与之前报道的抗病性反应吻合。此外,还制备了天然XA21蛋白的抗体,对CX8621不同时期、不同组织中XA21蛋白的表达量进行了检测,结果发现在种子中检测不到XA21蛋白。由此,通过对外源基因Xa21的整合和表达分析,为CX8621的转基因生物安全评价提供了部分科学依据。
【英文摘要】 Agrobacterium tumefaciens-mediated transformation system has been widely applied. However, the function of target gene is affected by multiple factors. With this system, we obtained a transgenic rice line CX8621 carrying the bacterial blight resistance gene Xa21. In previous work, we have confirmed that it was selectable maker-free and vector backbone-free. And after 16 generations of breeding, it still maintained perfect resistance to bacterial blight disease. On this basis, we analyzed the integration and...
【基金】 转基因生物新品种培育重大专项(No.2014ZX08001-002); 国家自然科学基金(No.31300999); 江汉大学科研启动项目(No.3003-06000043)资助~~
【更新日期】 2016-10-11
【分类号】 S511;Q943.2
【正文快照】 Received:December 24,2015;Accepted:January 28,2016Supported by:National Transgenic Major Program of China(No.2014ZX08001-002),National Natural Science Foundation of China(No.31300999),Internal Grant of Jianhan University(No.3003-06000043).Corresponding au

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