| 
  中国学术期刊网络出版总库
  关闭
人源NOVA1蛋白的真核表达及其抗低氧活性鉴定  
   推荐 CAJ下载 PDF下载
【英文篇名】 Eukaryotic expression of human NOVA1 protein and identification of its anti-hypoxia activity
【下载频次】 ★★☆
【作者】 李华玲; 吕贝; 孔玲; 陈欣虹; 朱素娟;
【英文作者】 Hualing Li; Bei Lü; Ling Kong; Xinhong Chen; Sujuan Zhu; Department of Biochemistry; Medical College of Yangzhou University; Life Science College of Yangzhou University;
【作者单位】 扬州大学医学院生物化学教研室; 扬州大学生技学院生物化学教研室;
【文献出处】 生物工程学报 , Chinese Journal of Biotechnology, 编辑部邮箱 2016年 04期  
期刊荣誉：中文核心期刊要目总览  ASPT来源刊  CJFD收录刊
【中文关键词】 人源NOVA1蛋白; 真核表达载体; 转染; 分布; 抗低氧;
【英文关键词】 human NOVA1 protein; eukaryotic expression vector; transfection; distribution; anti-hypoxia;
【摘要】 构建人NOVA1基因的真核表达载体pCMV-Myc-NOVA1,转染PC12细胞后筛选最佳转染条件,进而结合细胞免疫组织化学研究NOVA1蛋白在PC12细胞中的表达分布,并探究其抗低氧活性。根据NCBI数据库NOVA1基因序列设计上下游引物,以pCR4-TOPO-NOVA1载体为模板采用聚合酶链式反应扩增获得NOVA1基因的全长c DNA编码序列,限制性内切酶SalⅠ和XhoⅠ双酶切后插入pCMV-Myc真核表达载体,酶切及直接测序验证后采用脂质体转染法转染入PC12细胞,针对转染比例和转染时间进行优化,进而采用实时定量PCR和Western blotting检测NOVA1蛋白的表达,最后采用细胞免疫组织化学检测NOVA1蛋白在PC12细胞中的表达定位及其抗低氧活性。通过酶切和直接测序验证,成功构建了真核表达载体pCMV-Myc-NOVA1;质粒和Lipo2000最佳转染比例为1:2.5,最佳转染时间为72 h;最佳转染条件下NOVA1基因和蛋白的表达水平显著增加,转染pCMV-Myc-NOVA1质粒后,NOVA1蛋白主要分布于细胞核和细胞质;过表达NOVA1的PC12细胞增殖活性明显增加。本文采用分子克隆的...
【英文摘要】 The aim of this study was to construct the eukaryotic expression vector of p CMV-Myc-NOVA1 based on NOVA1 gene, and to screen the optimum expression condition after transfecting to PC12 cells, and further to explore the distribution of NOVA1 protein in PC12 cells using cell immunohistochemistry, and to identifyits anti-hypoxia activity. According to the NOVA1 gene sequence of NCBI database, we designed the upstream and downstream primers, and performed polymerase chain reaction(PCR) to amplify the full leng...
【基金】 国家自然科学基金(Nos.81100862,8167050872,2015CXJ070)资助~~
【更新日期】 2016-05-06
【分类号】 Q78
【正文快照】 NOVA蛋白家族是一类仅表达于中枢神经系统的RNA结合蛋白[1-2],作为神经副肿瘤性眼阵挛共济失调症(Paraneoplastic opsoclonusmyoclonus ataxia,POMA)的抗原而被最早发现,是第一个被确认的哺乳动物神经特异性的剪接因子[3-4]。NOVA蛋白是序列特异性的RNA结合蛋白,通过其KH结构域

xxx
【相似文献】
中国期刊全文数据库
中国优秀硕士学位论文全文数据库
中国博士学位论文全文数据库
中国重要会议论文全文数据库
中国重要报纸全文数据库
中国学术期刊网络出版总库
点击下列相关研究机构和相关文献作者，可以直接查到这些机构和作者被《中国知识资源总库》收录的其它文献，使您全面了解该机构和该作者的研究动态和历史。
【文献分类导航】从导航的最底层可以看到与本文研究领域相同的文献，从上层导航可以浏览更多相关领域的文献。

生物科学
　 分子生物学
　　 基因工程(遗传工程）
  
 
  CNKI系列数据库编辑出版及版权所有：中国学术期刊(光盘版)电子杂志社
中国知网技术服务及网站系统软件版权所有：清华同方知网(北京)技术有限公司
其它数据库版权所有：各数据库编辑出版单位（见各库版权信息）
京ICP证040431号    互联网出版许可证 新出网证（京）字008号