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重组大肠杆菌SAHN和LuxS蛋白表达及群感效应分析  
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【英文篇名】 Construction of recombinant plasmid and analysis of quorum sensing for E.coli SAHN and LuxS
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【作者】 李超; 张玉; 贺盛; 谷劲松;
【英文作者】 LI Chao; ZHANG Yu; HE Sheng; GU Jinsong; School of Biological Science and Technology; University of Jinan; School of Biomedical Sciences; Huaqiao University;
【作者单位】 济南大学生物科学与技术学院; 华侨大学生物医学学院;
【文献出处】 济南大学学报(自然科学版) , Journal of University of Jinan(Science and Technology), 编辑部邮箱 2016年 06期  
期刊荣誉:中文核心期刊要目总览  ASPT来源刊  CJFD收录刊
【中文关键词】 S-腺苷高半胱氨酸核苷酶; S-核糖基高半胱氨酸酶; 重组表达; 群感效应; 生物膜;
【英文关键词】 S-adenosylhomocysteine nucleosidase; S-ribosylhomocysteinase; recombinant expression; quorum sensing effect; biofilm;
【摘要】 为研究大肠杆菌细胞内S-腺苷高半胱氨酸核苷酶(S-adenosylhomocysteine nucleosidase,SAHN)与S-核糖基高半胱氨酸酶(S-ribosylhomocysteinase,Lux S)的活性对菌体群感效应的影响,利用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)扩增sahn与lux S目的基因,构建p ET-28a-SAHN与p ET-28a-Lux S重组表达载体,转化大肠杆菌BL21,以IPTG诱导表达;以哈氏弧菌BB170为报告菌株,通过测定诱导前后的荧光强度检测信号分子AI-2相对量;通过96孔板生物膜实验,对构建菌株在诱导前后的生物膜生成量进行测定。结果表明:SAHN与Lux S酶蛋白在诱导后的大肠杆菌AI-2的表达量分别为诱导前的3.93、3.89倍,生物膜致密度分别为诱导前的1.8、1.6倍;大肠杆菌经诱导后,表达过量的SAHN酶蛋白对菌体的生长分裂及群感效应的影响更大。
【英文摘要】 To explore the influence about the expression levels of the two enzymes( SHAN and Lux S) in E. coli cells and quorum sensing of bacteria,the gene sahn and lux S were amplified by PCR,and then linked to vector p ET- 28 a so as to construct p ET- 28a-SAHN and p ET- 28a- Lux S,which were transformed into E. coli BL21. Expressions of SAHN and Lux S were induced by IPTG. The two enzymes were excessive expressed in the recombinant strains,so they promoted the biochemical pathways about quorum sensing of bacteria....
【基金】 国家自然科学基金项目(31370090;31070046); 山东省重点研发计划项目(2015GSF121006)
【更新日期】 2016-12-15
【分类号】 R378.21
【正文快照】 在感染病领域,耐药细菌的感染是全球关注的重要问题之一。目前采用的相应策略主要有:合理使用抗生素以降低致细菌耐药变异速度;探讨新的抑菌途径,研发新型抗菌药物对抗耐药菌。通过甲基化修饰改变抗菌药物靶点的结构是以大肠杆菌(E.coli)为代表的致病菌的一种重要的耐药机制[1]

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