远细胞参与血管损伤后平滑肌细胞增殖及机制研究

【摘要】 远细胞(TCs)是一种新型间质细胞,分布于机体的多个组织和器官,参与组织的再生和修复.但是,TCs在血管中的功能及作用机制尚未见相关报道.本研究通过建立大鼠(Rattus norvegicus)颈总动脉球囊损伤(CABI)模型,利用透射电子显微镜(TEM)及免疫荧光双染CD34/vimentin检测模型中TCs的变化;于体外分离培养血管TCs,探索TCs的作用及机制.免疫荧光定量分析显示,与假手术组(Sham组)相比,损伤组(CABI组)TCs数目明显增多((7.2±1.0)/mm~2 vs(20.4±1.8)/mm~2,P<0.001).取TCs培养上清孵育血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs),经流式细胞仪分析VSMCs的细胞周期,发现与对照组(TCs-)相比,TCs培养上清孵育VSMCs(TCs+)48 h后,处于S期和G2/M期的VSMCs百分比升高约5%((10.68+3.53)%vs(13.51+5.46)%,(TCs-)vs(TCs+),P<0.05).原位杂交结果显示,血管TCs内miR-24的表达水平明显高于VSMCs,高出约3倍(P<0.001).预拮抗TCs内的miR-24后,TCs培养上清对VSMCs的促增殖效应减弱,表现为与对照组相比,处于S期和G2/M期VSMCs细胞百分比明显减少,分别为(12.76+4.92)%vs(9.89+2.85)%,(antagomir-NC vs antagomir-24,P<0.05).上述结果表明,血管TCs能够促进VSMCs的增殖,并且miR-24参与了TCs介导的促VSMCs增殖作用.更多还原