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鸡源志贺氏菌IpaC基因新型表达载体构建及其在毕赤酵母中的表达  
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【英文篇名】 Construction of new expression vector of chicken-derived Shigella IpaC gene and its expression in Pichia pastoris
【下载频次】 ★★
【作者】 马金玉; 韩志霞; 蒋大伟; 王亚宾; 许兰菊; 苗银萍; 孔江南;
【英文作者】 MA Jinyu; HAN Zhixia; JIANG Dawei; WANG Yabin; XU Lanju; MIAO Yinping; KONG Jiangnan; College of Animal Science and Veterinary Medicine; Henan Agricultural University;
【作者单位】 河南农业大学牧医工程学院;
【文献出处】 黑龙江畜牧兽医 , Heilongjiang Animal Science and Veterinary Medicine, 编辑部邮箱 2016年 19期  
期刊荣誉：中文核心期刊要目总览  ASPT来源刊  中国期刊方阵  CJFD收录刊
【中文关键词】 鸡源志贺氏菌; IpaC基因; 毕赤酵母; pGAPZA; 真核信号肽;
【英文关键词】 chicken-derived Shigella; IpaC gene; Pichia pastoris; pGAPZA; eukaryotic signal peptide;
【摘要】 为使鸡源志贺氏菌IpaC蛋白保持天然的生物学活性,在毕赤酵母表达系统中实现分泌表达,进一步研究IpaC蛋白的生物学功能,本研究在不改变IpaC蛋白氨基酸序列的情况下,根据酵母密码子偏爱性优化合成IpaC#基因,利用真核表达载体p GAPZA和8种真核信号肽,分别构建真核表达载体pGAPZA-Inu/Inv/Kil/Lys/Mat/Amy/Glu/Ser-IpaC#,然后将线性化的重组质粒电转化至毕赤酵母X-33中,对阳性转化子进行表达,并用SDS-PAGE及Western-blot检测其表达产物。结果表明:在8种重组菌表达产物的菌体沉淀中检测到大小约为60 ku的目的蛋白。说明鸡源志贺氏菌IpaC基因成功实现了在毕赤酵母的胞内表达。
【英文摘要】 To keep the natural biological activities of Chicken- derived Shigella IpaC protein to achieve secretory expression in Pichia pastoris expression system and further study biological function of IpaC protein,the IpaC# gene was optimized and synthesized according to the yeast codon preference without changing the amino acid sequence of IpaC protein in this research. The eukaryotic expression vectors p GAPZA- Inu /Inv / Kil / Lys / Mat / Amy / Glu / Ser- IpaC# were constructed using eukaryotic expression vecto...
【基金】 国家自然科学基金项目(31272568)
【更新日期】 2016-11-17
【分类号】 S852.61
【正文快照】 志贺氏菌是肠杆菌科具有高度传染性和严重危害性的革兰氏阴性兼性厌氧菌,主要侵袭肠黏膜上皮细胞,引起腹痛、腹泻和排黏液性脓血便,伴有发热和全身毒血症症状,严重者可能导致死亡[1]。志贺氏菌的宿主具有广泛性,不但感染人引起痢疾,还可感染多种动物引起发病和死亡,尤其是幼龄?

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