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A型口蹄疫VP1基因的原核表达及纯化  
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【英文篇名】 Prokaryotic expression and purification of the VP1 gene from Foot- and- mouth disease virus( FMDV) type A
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【作者】 刘清源; 向华; 黄元; 陈晶; 向蓉; 郑海学; 刘宇;
【英文作者】 LIU Qingyuan; XIANG Hua; HUANG Yuan; CHEN Jing; XIANG Rong; ZHENG Haixue; LIU Yu; Guangdong Open Laboratory of Veterinary Public Health; Institute of Animal Health; Guangdong Academy of Agricultural Sciences; College of Veterinary Medicine; South China Agricultural University; State Key Laboratory of Veterinary Etiological Biology; Lanzhou Veterinary Research Institute; Chinese Academy of Agricultural Sciences;
【作者单位】 广东省农业科学院动物卫生研究所/广东省兽医公共卫生公共实验室; 华南农业大学兽医学院; 中国农业科学院兰州兽医研究所/家畜疫病病原微生物国家重点实验室;
【文献出处】 黑龙江畜牧兽医 , Heilongjiang Animal Science and Veterinary Medicine, 编辑部邮箱 2016年 09期  
期刊荣誉:中文核心期刊要目总览  ASPT来源刊  中国期刊方阵  CJFD收录刊
【中文关键词】 口蹄疫病毒(FMDV); VP1基因; 克隆表达; 鉴定; 纯化;
【英文关键词】 Foot-and-mouth disease virus(FMDV); VP1 gene; cloning and expression; identification; purification;
【摘要】 为了研究A型口蹄疫病毒(FMDV)VP1蛋白的免疫原性,试验采用PCR方法从口蹄疫阳性质粒p MD-18-P1中扩增得到目的基因VP1,与原核表达载体p ET-28a连接,构建重组质粒p ET-28a-VP1,转化大肠杆菌Rosetta(DE3)感受态细胞,筛选的阳性菌落用IPTG诱导表达,收集菌液进行SDS-PAGE电泳,通过Western-blot分析蛋白的免疫原性,并用镍亲和树脂纯化鉴定后的重组蛋白。结果表明:重组质粒p ET-28a-VP1经PCR及酶切鉴定证明构建正确;重组质粒能够在大肠杆菌中大量表达,表达产物的分子质量大小约为26 ku,且能被口蹄疫阳性血清识别;镍亲和树脂纯化的蛋白条带单一。说明该蛋白具有免疫学活性,且纯度较高。
【英文摘要】 To study the immunogenicity of VP1 protein of Foot- and- mouth disease virus( FMDV) type A,a target gene VP1 was amplified from the plasmid p MD- 18- P1 of foot- and- mouth disease( FMD) using PCR assay. The target gene VP1 was linked with prokaryotic expression vector p ET- 28 a vector to construct a recombined plasmid p ET- 28a- VP1,and then the recombined plasmid was transformed into Escherichia coli Rosetta( DE3) competent cells. The positive colonies were screened,and then the expression of protein was...
【基金】 科技部农业科技成果转化基金项目(2013GBZE000352); 广东省科技厅重点实验室建设支撑项目(2012A061100006); 广东省农业科学院院长基金项目(201530); 广东省主体机构创新能力建设专项(2011)
【更新日期】 2016-06-17
【分类号】 S852.65
【正文快照】 病病原微生物国家重点实验室,兰州730046)口蹄疫(foot-and-mouth disease,FMD)是由口蹄疫病毒(Foot-and-mouth disease virus,FMDV)引起的猪、牛、羊等偶蹄动物的一种急性、热性、高度接触性传染病,对家畜的生产力及畜产品质量造成严重危害,给畜牧业造成重大经济损失,国际兽疫?

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