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黄色短杆菌ilvN基因定点突变和ilvBN、ilvC串联表达对L-缬氨酸产量的影响  
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【英文篇名】 Effects of Brevibacterium flavum with directed mutagenesis of ilvN and co-expression of ilvBNC cluster on L-valine production
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【作者】 曾邦定; 黄钦耿; 梁玲; 郭小雷; 王明兹; 施巧琴; 吴松刚;
【英文作者】 ZENG Bangding; HUANG Qingeng; LIANG Ling; GUO Xiaolei; WANG Mingzi; SHI Qiaoqin; WU Songgang; College of Life Sciences; Engineering Research Center of Industrial Microbiology of Ministry of Education; Fujian Normal University; Fuzhou Research Center of Fujian Maidan Biology Group Co.; Ltd.;
【作者单位】 福建师范大学生命科学学院工业微生物教育部工程研究中心; 福建省麦丹生物集团有限公司福州研究中心;
【文献出处】 化工学报 , CIESC Journal, 编辑部邮箱 2016年 07期  
期刊荣誉:中文核心期刊要目总览  ASPT来源刊  中国期刊方阵  CJFD收录刊
【中文关键词】 L-缬氨酸; 定点突变; 乙酰羟酸合成酶; 乙酰羟酸异构还原酶; 共表达;
【英文关键词】 L-valine; site-specific mutagenesis; acetohydroxy acid synthase; acetohydroxy acid isomeroreductase; co-expression;
【摘要】 由ilv BN、ilv C基因编码的乙酰羟酸合成酶(AHAS)和乙酰羟酸异构还原酶(AHAIR)是L-缬氨酸合成途径的两个关键酶。本实验以黄色短杆菌Brevibacterium flavum MD515为出发菌株,通过PCR技术扩增其ilv BN和ilv C基因,对调节亚基ilv N进行定点突变,获得抗反馈抑制突变型编码基因ilv BNrC;然后将其插入穿梭表达载体p Z8-1中,构建串联表达质粒p Z8-1-ilv BNrC并转化出发菌株,筛选获得工程菌株B.flavum MD515/p Z8-1-ilv BNrC。摇瓶发酵该工程菌株L-缬氨酸产量达29.5 g·L-1,较出发菌株提高27.7%,同时生长速度和生物量也比出发菌株有所提高,丙氨酸含量降低,L-亮氨酸及L-异亮氨酸含量提高。在30 L发酵罐连续补料发酵60 h后L-缬氨酸产量达61.7 g·L-1,糖酸转化率为39.2%。菌株MD515/p Z8-1-ilv BNrC发酵液透光率较出发菌株高且蛋白含量低,这些特性有利于发酵液后期的分离提取。
【英文摘要】 Acetohydroxy acid synthase(AHAS) and acetohydroxy acid isomeroreductase(AHAIR) encoded by ilv BN and ilv C are two key enzymes which play important roles in the biosynthetic pathway of L-valine.Brevibacterium flavum MD515 was used as the origin strain and site-specific mutagenesis was performed in its ilv N gene which coded for the regulatory subunit of AHAS,resulting in the obtainment of an anti-feedback inhibition gene,named ilv BN'C.Then,the ilv BNrC gene was ligased to plasmid p Z8-1 for construction of...
【更新日期】 2016-07-21
【分类号】 TQ922
【正文快照】 Received date:2015-12-21.Corresponding author:WANG Mingzi,mingziw@fjnu.edu.cn引言L-缬氨酸(valine)是一种支链氨基酸,广泛应用于医药、食品及调味剂、动物饲料和化妆品等行业[1-3]。目前,发酵法、直接提取法和化学合成法是工业生产L-缬氨酸的3种主要方法[4]。微生物发酵?

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