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鲑鱼甲病毒E1基因高保守区融合表达及免疫特性的分析  
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【英文篇名】 Prokaryotic expression and analysis of a recombinant fusion protein of highly conserved region of salmonid alphavirus E1 gene
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【作者】 蒋烨; 杜航; 唐丽杰; 乔薪瑗; 王丽; 管雪婷; 姜艳平; 崔文; 李一经; 刘敏;
【英文作者】 JIANG Ye; DU Hang; TANG Li-jie; QIAO Xin-yuan; WANG Li; GUAN Xue-ting; JIANG Yan-ping; CUI Wen; LI Yi-jing; LIU Min; College of Animal Science and Technology; Northeast Agricultural University; College of Veterinary Medicine;
【作者单位】 东北农业大学动物科学与技术学院; 东北农业大学动物医学学院;
【文献出处】 淡水渔业 , Freshwater Fisheries, 编辑部邮箱 2016年 04期  
期刊荣誉:中文核心期刊要目总览  ASPT来源刊  CJFD收录刊
【中文关键词】 鲑鱼甲病毒(salmonid alphavirus; SAV); E1高保守蛋白; 原核表达; 免疫特性;
【英文关键词】 salmonid alphavirus; highly conserved E1 protein; prokaryotic expression; immunogenicity;
【摘要】 根据Gen Bank中公布的鲑鱼甲病毒(salmonid alphavirus,SAV)SAV 1、SAV 2和SAV3三个基因型中E1基因,选择高保守序列702 bp(436-1137)合成基因,命名为SAV E1,将其克隆到原核表达载体p Cold TF中构建重组质粒。然后将重组质粒转化到大肠杆菌感受态细胞BL21中,经终浓度为1.0 mmol/L的IPTG诱导表达,SDSPAGE和Western blot鉴定,重组蛋白均获得了表达,表达E1重组蛋白约95 k D。用镍离子亲和层析柱纯化重组蛋白,制备抗血清。间接ELISA结果显示,鼠抗重组蛋白E1血清效价为1∶25 600;间接免疫荧光结果显示,鼠抗重组E1蛋白血清可与SAV发生特异反应,由此表明表达的E1重组蛋白具有良好的免疫原性和免疫反应性,为SAV检测方法的建立提供理论依据。
【英文摘要】 Highly conservative sequence of salmonid alphavirus E1 gene( 702 bp) was synthesized according to sequences of E1 gene of SAV1,SAV2 and SAV3 published in Gen Bank. It was cloned into prokaryotic expression vector p Cold TF to construct recombinant plasmid. The recombinant plasmid was transformed into E. coli BL21 cells. The expression of recombinant plasmid p Cold TF in E. coli BL21 was induced using IPTG at 1. 0 mmol / L. The target protein of 95 k D was obtained and confirmed by SDS-PAGE and Western blot....
【基金】 国家科技支撑计划(2013BAD12B02)
【更新日期】 2016-08-18
【分类号】 S941.41
【正文快照】 鲑鱼甲病毒(salmonid alphavirus,SAV)隶属于披膜病毒科(Togaviridae)甲病毒属(Alphavirus),主要感染大西洋鲑(salmo salar)和虹鳟(Oncorhyn-chus mykiss)引起胰腺、心肌炎症和昏睡等症状,致死率达1%~48%,并在水产养殖的各个阶段均有爆发[1-2]。自从1995年Nelson等在爱尔兰成功

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