RWD结构小泛素化增强子与缺氧诱导因子-1α在AtT-20细胞的表达

【摘要】 目的研究RWD结构小泛素化增强子(RWD containing sumoylation enhancer,RSUME)调控缺氧诱导因子(hypoxia-inducible factor 1-alpha,HIF-1α)对At T-20细胞侵袭的影响。方法通过氯化钴模拟小鼠垂体腺瘤At T-20细胞的缺氧环境,并应用实时荧光定量PCR及蛋白质印迹法检测RSUME、HIF-1α的m RNA和蛋白水平的改变;然后运用HIF-1α小干扰RNA(small interfering RNA,si RNA)及阴性对照序列转染小鼠垂体腺瘤At T-20细胞,实时荧光定量PCR及蛋白质印迹法检测RSUME的m RNA和蛋白水平的改变;运用RSUME si RNA及阴性对照序列转染小鼠垂体腺瘤At T-20细胞后,实时荧光定量PCR及蛋白质印迹法检测HIF-1α的m RNA和蛋白水平的改变;并用Transwell及MTT法检测At T-20细胞侵袭的改变。结果氯化钴作用At T-20细胞后,细胞中RSUME的蛋白(P=0.003)和HIF-1α的蛋白(P=0.002)水平明显升高;HIF-1αsi RNA转染的At T-20细胞中RSUME m RNA(P=0.162)及蛋白(P=0.668)水平表达无明显变化;RSUME si RNA转染的At T-20细胞中HIF-1α蛋白水平表达明显降低(P<0.001),而m RNA水平未见明显改变(P=0.136);RSUME si RNA转染组At T-20细胞侵袭率较RSUME阴性对照组及空白对照组低(侵袭抑制率=26.2%±8.4%)。结论缺氧可诱导RSUME的表达,RSUME可调控HIF-1α的蛋白水平的作用影响At T-20细胞的侵袭。更多还原