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麻花秦艽ISSR-PCR反应体系的建立与优化  
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【英文篇名】 Establishment and Optimization of ISSR-PCR Reaction System for Gentiana straminea
【下载频次】 ★★★★☆
【作者】 朱田田; 晋玲; 张裴斯; 林丽; 张弦飞;
【英文作者】 ZHU Tian-tian; JIN Ling; ZHANG Pei-si; LIN Li; ZHANG Xian-fei; Institute of Chinese (Tibetan) Medicinal Resources; Key Laboratory of Chemistry and Quality for Chinese (Tibetan) Medicine of Colleges and Universities in Gansu Province; Institute of Genetic Breeding of Medicinal Plant; Gansu University of Chinese Medicine;
【作者单位】 甘肃中医学院中(藏)药资源研究所; 甘肃省高校中(藏)药化学与质量研究省级重点实验室; 药用植物遗传育种研究所;
【文献出处】 中国实验方剂学杂志 , Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae, 编辑部邮箱 2015年 06期  
期刊荣誉：中文核心期刊要目总览  ASPT来源刊  CJFD收录刊
【中文关键词】 麻花秦艽; ISSR反应体系; 退火温度; UBC-809引物;
【英文关键词】 Gentiana straminea; inter-simple sequence repeat reaction system; annealing temperature; UBC-809 primer;
【摘要】 目的:建立麻花秦艽的简单重复序列区间-聚合酶链反应(ISSR-PCR)最佳反应体系,为该药材的种质鉴定及遗传多样性等研究提供参考。方法:运用单因素试验和正交试验优选麻花秦艽的ISSR-PCR反应体系中DNA模板用量,Mg2+浓度,dNTPs浓度,TaqDNA聚合酶用量和引物浓度等参数,确定麻花秦艽每条引物的最佳退火温度。结果:ISSR-PCR最佳反应体系(20μL)为模板DNA1μL(36mg·L-1),10×PCR缓冲液(含Mg2+)1.75μL(20mmol·L-1),dNTPs0.8μL(10mmol·L-1),Taq酶0.1μL(0.5%)及引物0.6μL(10mmol·L-1);筛选出12条多态性高、扩增稳定的ISSR引物,UBC-809引物的最佳退火温度55.5℃。扩增出的7条带中多态性带为6条,多态性位点比率85.71%。结论:建立的麻花秦艽ISSR-PCR反应体系稳定可靠,位于500bp处的条带为非多态性条带,可作为该种属的特征性条带。
【英文摘要】 Objective: To establish optimal inter-simple sequence repeat-polymerase chain reaction(ISSR-PCR) reaction system for Gentiana straminea and provide a reference for medicinal germplasm identification and genetic diversity research.Method: Influencing factors of ISSR-RCR reaction system(template DNA,Mg2 +,d NTPs,Taq DNA polymerase,primer and annealing temperature) were selected and optimized by single factor tests and orthogonal test.Result: Optimum reaction system(20μL) contained template DNA of 1μL(36mg·L-1...
【基金】 中央本级重大增减支项目(20603020212,20603020110); 甘肃省中医药科学技术研究课题重点项目(GZK-2010-Z2)
【更新日期】 2015-04-09
【分类号】 S567.2
【正文快照】 [网络出版时间]2015-01-27 11:41麻花秦艽习称麻花艽,具有清热利胆、舒筋止痛之功效,可用于治疗风湿性关节炎、肺结核、低热盗汗、黄疸型肝炎等[1-2]。由于近年来临床用药量的增加与多年的过度采挖,致使麻花秦艽在我国的种群数量和分布范围日趋缩减,种质资源急待保护。目前,国?

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