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金黄色葡萄球菌重组表皮剥脱毒素A的原核表达  
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【英文篇名】 Prokaryotic expression of exfoliative toxin A from Staphylococcus aureus
【下载频次】 ★★☆
【作者】 王毅; 肖异珠; 杨致邦; 欧阳莹; 李咏梅; 罗晓燕;
【英文作者】 Wang Yi; Xiao Yizhu; Yang Zhibang; Ouyang Ying; Li Yongmei; Luo Xiaoyan; Teaching and Research Section of Immunology; School of Basic Medical Sciences; Chongqing Medical University; Department of Dermatology; The Affiliated Children's Hospital of Chongqing Medical University; Teaching and Research Section of Pathogenic Biology;
【作者单位】 重庆医科大学基础医学院免疫学教研室; 重庆医科大学附属儿童医院皮肤科; 重庆医科大学基础医学院病原生物学教研室;
【文献出处】 重庆医科大学学报 , Journal of Chongqing Medical University, 编辑部邮箱 2015年 03期  
期刊荣誉:中文核心期刊要目总览  ASPT来源刊  CJFD收录刊
【中文关键词】 金黄色葡萄球菌; 葡萄球菌性烫伤样皮肤综合征; 表皮剥脱毒素A; 原核表达;
【英文关键词】 staphylococcus aureus; staphylococcal scalded skin syndrome; exfoliative toxins A; prokaryotic expression;
【摘要】 目的:通过基因工程技术获取重组表皮剥脱毒素A(recombine exfoliative toxin A,r ETA),为深入研究表皮剥脱毒素的致病机制提供实验材料。方法:根据Gen Bank公布的ETA基因序列设计引物,从金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,S.aureus)基因组中扩增ETA基因,插入原核表达载体p QE30,构建重组质粒p QE30-ETA。将p QE30-ETA转化表达菌E.coli M15,优化诱导表达条件,SDS-PAGE分析重组蛋白的表达,Western blot鉴定。重组蛋白经Ni2+-NTA树脂纯化后,注入BALB/C小鼠皮下,观察皮肤病理改变,鉴定重组蛋白的生物学活性。结果:重组质粒p QE30-ETA序列分析显示插入的基因片段全长927 bp,与基因文库中的ETA序列完全吻合。SDS-PAGE分析显示表达产物相对分子量约为27 k D,在IPTG终浓度0.1 mmol/L,诱导时间4 h,可得到最大表达量的可溶性蛋白,约为20%。Western blot显示与S.aureus产生的ETA蛋白在同一位置,重组蛋白经Ni2+-NTA树脂纯化后蛋白纯度达...
【英文摘要】 Objective:To obtain the recombine exfoliative toxin A(r ETA)by the technique of gene engineering and to provide materials to study the pathogenic mechanism of the exfoliative toxin(ET). Methods:The primers were designed according to the gene sequence of ETA gene announced by Gene Bank. The ETA gene was amplified from the genome of S.aureus and was inserted into the prokaryotic expression vector p QE30. The recombinant plasmid p QE30-ETA was built and was translated into E.coli M15. After the expression cond...
【更新日期】 2015-05-21
【分类号】 R378
【正文快照】 3.重庆医科大学基础医学院病原生物学教研室,重庆400016)葡萄球菌性烫伤样皮肤综合征(staphylococcalscalded skin syndrome,SSSS)是由金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,S.aureus)产生的表皮剥脱毒素(exfoliative toxin,ET)引起的以皮肤形成浅表水疱为特征的皮肤病,根据其

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