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实时荧光PCR检测Nam Dinh病毒方法的建立及初步应用  
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【英文篇名】 The establishment and initial application of real-time fluorescent PCR detection of Nam Dinh virus
【下载频次】 ★★
【作者】 梁克峰; 刘渠; 王德全; 周健明; 金玉娟; 陈应坚; 李静媚; 甘莉萍; 杨慧;
【英文作者】 LIANG Ke-feng; LIU Qu; WANG De-quan; ZHOU Jian-ming; JIN Yu-juan; CHEN Ying-jian; LI Jing-mei; GAN Li-ping; YANG Hui; Guangdong Pharmaceutical University; Longgang Center for Disease Control and Prevention;
【作者单位】 广东药学院; 深圳市龙岗区疾病预防控制中心;
【文献出处】 中国媒介生物学及控制杂志 , Chinese Journal of Vector Biology and Control, 编辑部邮箱 2015年 05期  
期刊荣誉:中文核心期刊要目总览  ASPT来源刊  CJFD收录刊
【中文关键词】 Nam Dinh病毒; 实时荧光定量PCR; Taq Man-MGB探针; 应用;
【英文关键词】 Nam Dinh virus; Real-time fluorescence PCR; Taq Man-MGB; Application;
【摘要】 目的建立一种快速、特异检测Nam Dinh病毒(NDi V)的实时荧光PCR方法。方法根据Gen Bank和本实验室分离的NDi V进行序列比对,找出保守序列(Rd Rp)并设计特异引物和Taq Man-MGB探针,通过调整引物、探针浓度,优化其反应条件,对方法做灵敏度、特异性、稳定性实验,以评价反应体系。结果 NDi V的Taq Man-MGB实时荧光PCR检测方法用时短,灵敏度高,最低检测下限为0.1 PFU。与登革热1~4血清型病毒、流行性乙型脑炎、人呼吸道合胞病毒、轮状病毒、星状病毒、腺病毒无交叉反应,特异性良好;将4份核酸含量不同的标准样品重复检测5次,平均Ct值变异系数范围为1.67%~3.68%,稳定性较高。通过监测,龙岗区蚊虫携带NDi V概率为18.00%。结论NDi V的Taq Man-MGB实时荧光PCR方法是一种快速、特异、灵敏、稳定性好的方法,可应用于流行病学环境监测,提高病毒的快速检测能力。
【英文摘要】 Objective To establish a rapid and specific real-time fluorescent PCR method for Nam Dinh virus(Ndi V).Methods According to the sequence alignment of Gen Bank and NDi V isolated by our laboratory, we found out the conservative sequence(Rd Rp) and design specific primers and Taq Man- MGB probe. In order to evaluate the reaction system, the concentration of primers and probe were adjusted to optimize the reaction conditions, and the sensitivity,specificity, stability tests for our method were also conducted.R...
【基金】 广东省自然科学基金(2014A030313583)~~
【更新日期】 2015-10-23
【分类号】 R440
【正文快照】 Nam Dinh病毒(NDi V)是一种在我国新发现的昆虫套式病毒。2002年由Nga等[1]从越南急性病毒性脑炎综合征患者的脑脊液中分离出全球首株NDi V。研究者根据病毒的分离地点将其命名为Nam Dinh virus。2013年,中国首次在深圳市龙岗地区的致倦库蚊(Culex pipiens quinquefasciatus)中

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