为了研究家蚕核型多角体病毒(Bombyx mori nucleopolyhedrovirus,BmNPV)基因orf98的功能,通过λRed重组系统定点敲除BmNPVorf98基因,构建缺失型重组病毒Bm98-ko-Bacmid;以Bac-to-Bac系统补回BmNPVorf98基因,构建补回型重组病毒Bm98-re-Bacmid;将野生型病毒(wtBacmid)、缺失型病毒(Bm98-koBacmid)和补回型病毒(Bm98-re-Bacmid)分别转染家蚕细胞BmN。病毒滴度检测结果显示,Bm98-ko-Bacmid可形成侵染性的病毒粒子,但数量显著降低(P<0.05).透射电子显微镜观察发现,Bm98-ko-Bacmid只产生游离的杆状病毒粒子,数量明显减少,而wtBacmid和Bm98-re-Bacmid产生大量具有囊膜结构的成熟病毒粒子。荧光定量聚合酶链反应分析结果表明,BmNPVorf98基因缺失对BmNPV病毒复制没有影响,而早期基因lef3、晚期基因vp39和极晚期基因p10的转录水平显著降低(P<0.05)。综上所述,BmNPVorf98基因对病毒复制是非必需的,但显著影响病毒的繁殖速度和包...
【英文摘要】
Baculoviruses have been considered as the powerful vectors to express the exogenous gene.And the representative vectors in baculovirus expression vector system is Autographa californica multinucleocapsid nucleopolyhedrovirus(AcMNPV)and Bombyx mori nucleopolyhedrovirus(BmNPV).The AcMNPV expression system has been widely applied in American and European countries.However,the BmNPV expression reaches a higher level over other systems,because BmNPV can infect silkworm larva or pupa.Moreover,silkworm is pretty n...
【基金】
国家高技术研究发展计划(863计划)项目(2011AA100603)
【更新日期】
2015-12-07
【分类号】
Q939.4
【正文快照】
proteins of over 60amino acids.杆状病毒是有囊膜包被的双链闭环超螺旋DNA病毒,在自然环境中专一感染节肢动物,产生的病毒粒子呈杆状,其基因组大小在80~180kb之间[1];根据其形态特征分为颗粒体病毒属(granuloviruses,GVs)和核型多角体病毒属(nucleopolyhedroviruses,NPVs)。?