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H5亚型禽流感病毒HA蛋白单克隆抗体的制备与鉴定  
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【英文篇名】 Preparation and characterization of monoclonal antibodies against HA protein of H5 subtype avian influenza virus
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【作者】 卢昆鹏; 崔鹏飞; 张芳; 王晶; 肖红波; 邓国华; 陈化兰;
【英文作者】 LU Kun-peng; CUI Peng-fei; ZHANG Fang; WANG Jing; XIAO Hong-bo; DENG Guo-hua; CHEN Hua-lan; College of Veterinary Medicine; Hunan Agricultural University; State Avian Influenza Reference Laboratory/State Key Laboratory of Veterinary Biotechnology/Harbin Veterinary Research Institute; Chinese Academy of Agricultural Sciences;
【作者单位】 湖南农业大学动物医学学院; 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所国家禽流感参考实验室/兽医生物技术国家重点实验室;
【文献出处】 中国兽医科学 , Chinese Veterinary Science, 编辑部邮箱 2015年 05期  
期刊荣誉：中文核心期刊要目总览  ASPT来源刊  中国期刊方阵  CJFD收录刊
【中文关键词】 禽流感病毒; 单克隆抗体; 血凝素;
【英文关键词】 avian influenza virus; monoclonal antibody; haemagglutinin;
【摘要】 为制备Clade 2.3.2分支H5亚型禽流感病毒HA蛋白的单克隆抗体,以灭活的超速离心浓缩纯化的H5N1亚型禽流感病毒A/duck/Guangdong/S1322/2010(DK/GD/S1322/2010)免疫6~8周龄的雌性BALB/c小鼠。取免疫后小鼠脾细胞,使其与骨髓瘤细胞(SP2/0)融合,通过血凝抑制(HI)和ELISA方法筛选,共获得2株能够稳定分泌HA蛋白特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞株A4和D11。2株单克隆抗体的重链均为IgG1,轻链均为κ链。经HI检测,A4和D11的细胞培养上清和腹水的抗体效价分别为23、22和211、211。HI和中和试验结果显示,这2株单克隆抗体与Clade 2.3.2.B分支和Clade 2.3.2.C分支的病毒反应性良好,而与Clade 2.3.4和Clade 7分支的病毒均不反应。间接免疫荧光试验结果表明,这2株单克隆抗体能够识别MDCK细胞内感染的H5亚型禽流感病毒DK/GD/S1322/2010。结果表明,本研究制备的2株单克隆抗体为H5亚型禽流感病毒的检测和诊断奠定了物质基础。
【英文摘要】 To prepare monoclonal antibodies(McAbs)against HA protein of Clade 2.3.2 H5 subtype avian influenza virus(AIV),six to eight-week old female BALB/c mice were immunized with the inactivated AIV A/duck/Guangdong/S1322/2010(DK/GD/S1322/2010),which was purified by ultracentrifugation.Mouse splenic cells were fused with SP2/0cells.By means of HI and ELISA tests,we got two hybridoma cell strains,then designated as A4 and D11,respectively.The heavy chain of the 2McAbs belongs to IgG1 subclass,and the light chain be...
【基金】 兽医生物技术国家重点实验室研究项目(SKLVBP201405)
【更新日期】 2015-05-29
【分类号】 S852.65
【正文快照】 禽流感(avian influenza,AI)是由正黏病毒科、流感病毒属的甲型流感病毒所引起的一种禽类传染病。根据致病力的不同,可将禽流感病毒分为低致病性禽流感病毒(LPAIV)和高致病性禽流感病毒(HPAIV)[1]。H5N1亚型禽流感病毒自从1996年首次在我国广东地区被发现以来,已经迅速地蔓延至

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