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牛传染性鼻气管炎病毒PCR检测方法的建立

Establishment and Verification of PCR for Latency of Bovine Herpesvirus 1

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【作者】 林梅缪德年黄克和张克春

【Author】 LIN Mei;MIAO De-nian;HUANG Ke-he;ZHANG Ke-chun;College of Veterinary Medicine,Nanjing Agricultural University;Shanghai Academy of Agricultural Sciences;Shanghai Institute of Dairy;

【机构】 南京农业大学动物医学院上海市农业科学院上海市奶牛研究所

【摘要】 为建立一种牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)PCR检测方法,依据IBRV的t K基因序列,设计合成PCR的引物,以IBRV的标准AV20毒株为对象,确定PCR最终反应体系为25μL,并优化了PCR反应条件。结果显示,该PCR方法可以扩增出301bp的特异性片段;对牧场中常见的BVDV进行PCR特异性检测,未检测到BVDV特异性条带;10倍稀释法验证PCR优化反应后的灵敏性为可检测出0.002TCID50的病毒量。结果表明,该方法可为牧场进行IBR疫情监测提供有效技术手段。

【Abstract】 Bovine herpesvirus 1(BHV-1),the causative agent of infectious bovine rhinotracheitis(IBR),is considered to be the most common viral pathogen found in bovine.PCR amplification was carried out in a final volume of 25 μL.The optimization of the PCR reaction components and cycling parameters was performed,respectively.The result of specific fragment for the standard IBRV by PCR amplified is 301 bp.The analytical specificity of the PCR was determined by testing two different types of virus were BVDV and IBRV.The sensitivity of the PCR was determined by testing sequential 10-fold dilutions of IBRV.The establishment of PCR in the assay could be an useful tool for monitoring BHV-1 in the farm.

【基金】 上海优质原料奶产业技术创新战略联盟(项目编号:13DZ051090013DZ0510900)
  • 【文献出处】 中国奶牛 ,China Dairy Cattle , 编辑部邮箱 ,2015年14期
  • 【分类号】S852.653
  • 【被引频次】9
  • 【下载频次】166
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