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【英文篇名】 |
Analysis on Dynamic Changes of WSSV Amount in Procambarus clarkii through Quantitative Real-time PCR |
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【下载频次】 |
★★★★★ |
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【作者】 |
张玲;
唐小千;
绳秀珍;
战文斌; |
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【英文作者】 |
Zhang Ling;
Tang Xiaoqian;
Sheng Xiuzhen;
Zhan Wenbin;
Key Laboratory of Mariculture;
Ministry of Education;
Ocean University of China; |
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【作者单位】 |
中国海洋大学海水养殖教育部重点实验室; |
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【文献出处】 |
中国动物检疫
, China Animal Health Inspection, 编辑部邮箱
2015年 06期
期刊荣誉：ASPT来源刊 CJFD收录刊 |
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【中文关键词】 |
克氏原螯虾(Procambarus clarkii);
白斑症病毒(WSSV);
实时荧光定量PCR;
病毒增殖; |
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【英文关键词】 |
Procambarus clarkii;
white spot syndrome virus;
quantitative real-time PCR;
virus proliferation; |
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【摘要】 |
本文建立了白斑症病毒(WSSV)实时荧光定量PCR标准曲线,结果显示其线性关系良好,利用建立的WSSV实时荧光定量PCR技术检测感染了WSSV后克氏原螯虾(Procambarus clarkii)组织内病毒数量的时序动态变化。注射WSSV粗提液感染克氏原螯虾,在感染后0h、3h、6h、12h、24h、36h、48h、60h和72h分别取螯虾鳃、血淋巴、心脏、附肢、造血组织和肌肉,提取组织DNA,实时荧光定量PCR测定WSSV浓度,发现感染后3h在附肢、鳃、血淋巴和造血组织中检测到病毒,12h时在各组织中皆检测到病毒,但浓度较低;24~48h内WSSV浓度呈指数增长,此时螯虾出现少量死亡;60~72h内WSSV数量缓慢增长达到平台期,螯虾累计死亡率快速升高。不同组织中的WSSV浓度有较大差异,附肢中浓度最高,血淋巴、鳃、心脏和造血组织稍低,肌肉中WSSV浓度最低;附肢中WSSV动态变化代表了WSSV增殖变化规律,是很好的病毒检测与病程进展评估材料。本文结果可为WSSV的早期诊断提供技术支持,为阐明WSSV感染增殖规律提供资料。 |
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【英文摘要】 |
A real-time quantitative PCR was developed and the absolute copy number of WSSV VP28 gene was quantified based on a standard curve in Procambarus clarkii infected with WSSV. Following intramuscular injection with WSSV,the gill,hemolymph,heart,muscle,pleopods and hemopoietic tissue of Procambarus clarkii were sampled at 0,3,6,12,24,36,48,60 and 72 h post infection(hpi),DNA was extracted from the samples and the viral load was analyzed. It was found that WSSV was detected in pleopod,gill hemolymph and hemopoi... |
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【基金】 |
国家科技支撑计划课题(2012BAD17B01);
公益性行业(农业)科研专项经费项目(201103034);
山东省科技发展计划项目(2014GNC111015)资助 |
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【更新日期】 |
2015-07-15 |
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【分类号】 |
S945.4 |
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【正文快照】 |
在养殖虾类的病毒性病原中,白斑症病毒(WSSV)是给虾类养殖业带来损失最大的一种病毒[1-2]。自白斑症病毒病在20世纪90年代初期首次大规模暴发以来,全世界有超过30个国家的对虾养殖业受其影响,造成巨大经济损失。WSSV的宿主范围非常广泛,可以感染对虾、龙虾、螯虾、蟹类、桡足类 |
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