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芍药种子cDNA-AFLP体系的建立  
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【英文篇名】 Establishment of c DNA-AFLP System of Paeonia lactiflora Seed
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【作者】 孙晓梅; 杨盼盼; 陆秀君; 周文强; 王丹; 杨宏光;
【英文作者】 SUN Xiao-mei; YANG Pan-pan; LU Xiu-jun; ZHOU Wen-qiang; WANG Dan; YANG Hong-guang; College of Forestry; Shenyang Agricultural University; Shenyang Botanical Garden;
【作者单位】 沈阳农业大学林学院; 沈阳市植物园;
【文献出处】 园艺学报 , Acta Horticulturae Sinica, 编辑部邮箱 2015年 03期  
期刊荣誉:中文核心期刊要目总览  ASPT来源刊  中国期刊方阵  CJFD收录刊
【中文关键词】 芍药; 种子; 休眠; cDNA-AFLP;
【英文关键词】 Paeonia lactiflora; seed; dormancy; cDNA-AFLP;
【摘要】 以芍药品种‘粉玉奴’与‘粉中楼’的杂交种子为试材,通过对影响cDNA-AFLP反应的重要因素进行优化,建立了适合于芍药种子的cDNA-AFLP分析体系,并对打破上胚轴与下胚轴休眠前后的种子基因表达差异进行了初步分析。结果表明:使用RNAprep Pure植物总RNA提取试剂盒提取的RNA较完整;cDNA利用EcoRⅠ和MseⅠ进行双酶切37℃4 h,65℃20 min,酶切充分;连接产物稀释10倍用于预扩增;预扩增产物稀释10倍,取5μL作为选择性扩增的模板,得到了较为清晰可辨的cDNA-AFLP谱带;打破下胚轴休眠前后约有3700条差异条带,打破上胚轴休眠前后约有1600条差异条带。
【英文摘要】 The research established a cDNA-AFLP analysis system which suited Paeonia lactiflora seed by using hybrid seeds of P.‘Fenyunu’ and P.‘Fenzhonglou’ as materials and optimizing the important factors which affect the reaction of cDNA-AFLP. In addition,we made a preliminary analysis on the expression difference of gene under the conditions of before and after breaking epicotyl and hypocotyl dormancy. The results indicated that total RNA was isolated from Paeonia lactiflora seeds using the RNAprep Pure Plant Kit...
【基金】 国家自然科学基金项目(31240028,31470696)
【更新日期】 2015-04-24
【分类号】 S682.12
【正文快照】 基于c DNA的扩增片段长度多态性指纹图谱(c DNA-based amplified fragment lengthpolymorphism fingerprinting,c DNA-AFLP)是Bachem等(1996)在AFLP技术的基础上发明的一种用于研究基因表达差异的RNA指纹分析技术。该技术无需预先知道序列信息,具有假阳性低、重复性好、可靠性?

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