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稳定表达猪skMLCK基因的小鼠成肌细胞株构建及鉴定

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【作者】 丛玲； 田玉民； 张尚松； 朱弘焱； 苏玉虹；

【机构】 辽宁医学院畜牧兽医学院； 辽宁省畜产品质量与安全工程重点实验室；

【摘要】 为了获得稳定表达猪skMLCK基因的小鼠成肌细胞C2C12细胞株,将猪skMLCK基因cDNA序列T-A克隆至pMD-18T载体;重组质粒经双酶切后,定向克隆至真核表达载体,获得表达重组质粒pEGFP-N1-skMLCK;经脂质体介导,重组质粒稳定转染入C2C12细胞中;通过实时定量PCR方法检测skMLCK基因的表达水平,以及其他相关基因的表达情况。结果:获得了稳定表达猪skMLCK基因的C2C12细胞株;连续培养30d后,用实时定量PCR方法检测到skMLCK基因高表达,同时发现CFL2b和MEF2C基因表达下调。试验表明稳定表达猪skMLCK基因的小鼠成肌细胞系构建成功,为猪skMLCK基因功能的进一步研究提供了前期工作基础。

【关键词】 skMLCK基因； C2C12细胞株； 稳定表达； 猪；
【基金】 国家自然科学基金(31272415∕C170102)
  • 【文献出处】 畜牧与兽医 ,Animal Husbandry & Veterinary Medicine , 编辑部邮箱 ,2015年01期
  • 【分类号】S828;Q78
  • 【被引频次】3
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