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猪LTβR基因克隆、结构功能预测、组织表达谱分析及真核表达载体构建  
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【英文篇名】 Gene Cloning,Prediction of Structure and Function,Analysis of Tissue Expression Profile and Construction of Eukaryotic Expression Vector of Pig LTβR Gene
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【作者】 吴正常; 戴超辉; 殷学梅; 孙寿永; 包文斌; 吴圣龙;
【英文作者】 WU Zheng-chang; DAI Chao-hui; YIN Xue-mei; SUN Shou-yong; BAO Wen-bin; WU Sheng-long; Key Laboratory for Animal Genetics; Breeding; Reproduction and Molecular Design of Jiangsu Province; College of Animal Science and Technology; Yangzhou University; Jiangsu Engineering Research Center for the Reproduction and Healthy Breeding of Boar;
【作者单位】 扬州大学动物科学与技术学院江苏省动物遗传繁育与分子设计重点实验室; 江苏省种猪繁育和健康养殖工程技术研究中心;
【文献出处】 畜牧兽医学报 , Chinese Journal of Animal and Veterinary Sciences, 编辑部邮箱 2015年 12期  
期刊荣誉:中文核心期刊要目总览  ASPT来源刊  CJFD收录刊
【中文关键词】 ; LTβR基因; 克隆; 真核表达载体; 蛋白结构与功能;
【英文关键词】 pig; LTβRgene; cloning; eukaryotic expression vector; structure and function of protein;
【摘要】 为了进一步探究猪LTβR基因的生物学功能,本研究以猪淋巴组织cDNA为模板扩增LTβR基因CDS区,进一步利用生物信息学对猪LTβR蛋白结构与功能以及参与的GO和Pathway通路进行分析,利用Real-time PCR检测LTβR基因在大白猪不同组织中的表达水平,同时将LTβR基因扩增产物克隆至真核表达载体pEGFPC1中,并分别转染猪HEK293和IPEC-J2小肠上皮细胞系,通过显微镜观察其表达情况。结果表明,克隆获得猪LTβR基因CDS区全长为1 209bp,编码402个氨基酸,发现LTβR为脂溶亲水性的不稳定蛋白,存在1个跨膜结构(205~227aa),不存在信号肽,亚细胞定位表明LTβR为非分泌型蛋白。LTβR蛋白具有2个糖基化位点,18个潜在的磷酸化位点,其中包括PKC、CKI、CDC2、GSK3、CDK5、INSR等10种保守的特异性蛋白质激酶的结合位点。该蛋白保守区域为2个TNFR superfamily,分别位于32~125和128~192位氨基酸,并发现C422T>A141V突变位于该区域内。KEGG和GO分析发现,LTβR基因共参与12项GO功能分类,同时还参与NF-kappa B信号...
【英文摘要】 In order to further explore the biological function of pig LTβR gene,the coding sequence(CDS)of LTβRgene was amplified from the cDNA of porcine lymphoid tissue and the protein structure and function,GO function,regulatory pathways of porcine LTβR were further analyzed by bioinformatics tools.Real-time PCR was used to detect the expression level of porcineLTβRgene in different tissues of Yorkshire.Meanwhile LTβRgene was cloned into the eukaryotic expression vector pEGFP-C1,then transfected into HEK293 cell a...
【基金】 转基因生物新品种培育科技重大专项(2014ZX08006-001B); 国家自然科学基金(31372285;31172183); 江苏高校优势学科建设工程资助项目(PAPD)
【更新日期】 2016-01-06
【分类号】 S828
【正文快照】 肠道是动物防止感染的第一道防线,肠道内各种免疫成分为其提供多方面、多层次的防护,构成了严密的免疫屏障,这就是肠道免疫系统,也叫黏膜免疫系统。肠道免疫系统是由免疫细胞、免疫球蛋白(IgA)及肠道微生物组成,其中猪肠道系统功能中起关键作用的是由B细胞转化为浆细胞后产生的

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