尼可霉素生物合成基因簇的改造及其异源表达-中国学术期刊网络出版总库

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尼可霉素生物合成基因簇的改造及其异源表达

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【英文篇名】	Engineering and heterologous expression of a nikkomycin biosynthetic gene cluster
【下载频次】	★★★★★
【作者】	王璐; 杜德尧; 李金娥; 田宇清; 刘浩; 牛国清; 谭华荣;
【英文作者】	Lu Wang; Deyao Du; Jin'e Li; Yuqing Tian; Hao Liu; Guoqing Niu; Huarong Tan; Key Laboratory of Industrial Fermentation Microbiology; Ministry of Education; Tianjin University of Science and Technology; State Key Laboratory of Microbial Resources; Institute of Microbiology; Chinese Academy of Sciences;
【作者单位】	天津科技大学生物工程学院教育部工业发酵微生物重点实验室; 中国科学院微生物研究所微生物资源前期开发国家重点实验室;
【文献出处】	微生物学报 , Acta Microbiologica Sinica, 编辑部邮箱 2015年 06期期刊荣誉：中文核心期刊要目总览 ASPT来源刊中国期刊方阵 CJFD收录刊
【中文关键词】	圈卷产色链霉菌; 尼可霉素; 生物合成基因簇; 异源表达; 抗菌活性; 产物鉴定;
【英文关键词】	Streptomyces ansochromogenes; nikkomycin; biosynthetic gene cluster; heterologous expression; antifungal activity; compound identific;
【摘要】	【目的】异源表达尼可霉素生物合成基因簇,为尼可霉素核苷和肽基缩合机制研究以及尼可霉素与其它核苷类抗生素的组合生物合成奠定基础。【方法】以含有尼可霉素生物合成基因簇的pNIK为出发质粒,通过PCR-targeting的方法,将基因簇中san G和san F的启动子替换为组成型hrd B启动子,构建重组质粒pNIKm。通过接合转移的方法分别将pNIK和pNIKm导入天蓝色链霉菌M1146中,获得异源表达菌株M1146-NIK和M1146-NIKm,并通过RT-PCR检测基因簇的表达情况。最后通过抗菌活性实验和产物的分离鉴定,比较M1146-NIK和M1146-NIKm的抗菌活性和尼可霉素的产生情况。【结果】pNIK和pNIKm在异源宿主天蓝色链霉菌M1146成功表达;M1146-NIK和M1146-NIKm均有明显的抗菌活性;M1146-NIK和M1146-NIKm均能产生少量的尼可霉素X、Z和假尼可霉素Z;M1146-NIK大量积累尿苷,而M1146-NIKm大量积累尿苷、核糖基-4-甲酰-4-咪唑-2-酮和吡啶同型苏氨酸。【结论】尼可霉素生物合成基因簇成功异源表达,并分离鉴定了尼可霉素产物及其生物合成中间体。...
【英文摘要】	[Objective] We expressed a nikkomycin biosynthetic gene cluster in the well-characterized surrogate Streptomyces coelicolor M1146.[Methods] By using PCR-targeting method,we replaced the promoters of san G and san F in pNIK,which contains nikkomycin biosynthetic gene cluster,with the hrd B promoter to generate pNIKm.We transferred pNIK and pNIKm into S.coelicolor M1146 by intergeneric conjugation and obtained M1146-NIK and M1146-NIKm,respectively.We then evaluated expression of the gene cluster in the hetero...
【基金】	国家重点基础研究发展计划——“国家973项目”(2013CB734001); 国家自然科学基金(31470206,31171202)~~
【更新日期】	2015-06-15
【分类号】	Q78
【正文快照】	微生物学报Acta Microbiologica Sinica55(6):707-718;4 June 2015ISSN 0001-6209;CN 11-1995/Qhttp://journals.im.ac.cn/actamicrocn尼可霉素生物合成基因簇的改造及其异源表达王璐1#,杜德尧2#,李金娥2,田宇清2,刘浩1,牛国清2,谭华荣21天津科技大学生物工程学院,教育部工业

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