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白蚁肠道元基因组来源高温β-葡萄糖苷酶Bgl17的酶学性质  
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【英文篇名】 Characterization of a β-glucosidase Bgl17 from a metagenomics library of termite gut
【下载频次】 ★★★★
【作者】 刘晓静; 钱昌丽; 周志华; 黄勇平; 李木旺; 王倩; 王钱福;
【英文作者】 LIU Xiao-Jing; QIAN Chang-Li; ZHOU Zhi-Hua; HUANG Yong-Ping; LI Mu-Wang; WANG Qian; WANG Qian-Fu; Sericultural Research Institute; Jiangsu University of Science and Technology; Key Laboratory of Synthetic Biology; Institute of Plant Physiology and Ecology; Shanghai Institutes for Biological Sciences; Chinese Academy of Science; Key Laboratory of Insect Developmental and Evolutionary Biology; Chinese Academy of Sciences; Sericultura...;
【作者单位】 江苏科技大学蚕业研究所; 中国科学院上海生命科学研究院植物生理生态研究所合成生物学重点实验室; 中国科学院上海生命科学研究院植物生理生态研究所昆虫发育与进化生物学重点实验室; 中国农业科学院蚕业研究所;
【文献出处】 微生物学通报 , Microbiology China, 编辑部邮箱 2015年 12期  
期刊荣誉：中文核心期刊要目总览  ASPT来源刊  中国期刊方阵  CJFD收录刊
【中文关键词】 短角球白蚁肠道; 元基因组; β-葡萄糖苷酶; 糖基水解酶第一家族; 水杨苷;
【英文关键词】 Globitermes brachycerastes gut; Metagenomic; β-Glucosidase; Glycosyl hydrolase family 1; Salicin;
【摘要】 【目的】对短角球白蚁(Globitermes brachycerastes)肠道元基因组文库中筛选得到的一个新型β-葡萄糖苷酶编码基因bgl17进行酶学性质研究。【方法】通过克隆与异源表达得到纯的Bgl17酶蛋白,根据Bgl17对底物的水解活性测定其稳定性及动力学参数,利用薄层层析确定其水解产物。【结果】该酶属于糖基水解酶第一家族(GHF1),对其特异性底物4-硝基苯基-β-D-吡喃葡萄糖苷(p NPGlc)的最适反应温度为70°C,最适p H为5.0。在最适反应条件下,该酶以p NPGlc为底物比活力为115.69 U/mg,以水杨苷为底物比活力为297.39 U/mg。以p NPGlc为底物时,其动力学参数Km值和Vmax分别为0.81 mmol/L和227.27μmol/(m L·min)。在稳定性方面,该酶在50°C处理1 h仍可保持50%的活性,在p H 5.0和6.0条件下,该酶的半衰期为1 h。【结论】该酶在较高的温度下具有较高的活性,且对水杨苷水解活性高,这点不同于已知的β-葡萄糖苷酶,推测其更有利于木质纤维素复杂结构的降解;该酶的最适温度远高于白蚁生存环境温度,可为研究白蚁降解纤维素的机理提...
【英文摘要】 [Objective] A novel β-glucosidase encoding gene bgl17, which was functional screened from a metagenomic library constructed from the gut of Globitermes brachycerastes, was expressed in Escherichia coli BL21 and its characteristic were studied. [Methods] The recombinant enzyme Bgl17 was purified, and the stability and kinetic were identified. And the hydrolysates were analyzed by thin layer chromatography. [Results] Bgl17 was belong to glycoside hydrolase family 1(GH1), and the optimal temperature and p H of...
【基金】 国家自然科学基金项目(No.31300071,31172153,31472046); 上海自然科学基金项目(No.13ZR1446600)
【更新日期】 2016-03-23
【分类号】 Q55
【正文快照】 木质纤维素是组成植物细胞壁的主要成分,是由纤维素、半纤维素和木质素组成的复杂结构[1],其中纤维素是地球上含量最丰富的一类可再生资源[2],每年经过光合作用产生的纤维素可达1012 t,而约90%未被利用[3]。完整的纤维素酶体系主要包括内切葡聚糖酶(简称EG,EC3.2.1.4)、纤维二?

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