产绿原酸内生菌的分离及其绿原酸合成途径关键基因的克隆和功能研究-中国学术期刊网络出版总库

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产绿原酸内生菌的分离及其绿原酸合成途径关键基因的克隆和功能研究

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【英文篇名】	Isolation of chlorogenic acid-producing endophyte and cloning of a key gene of chlorogenic acid synthetic pathway
【下载频次】	★★★★★
【作者】	王川; 李丽; 魏丕伟; 黄非;
【英文作者】	WANG Chuan; LI Li; WEI Pi-Wei; HUANG Fei; College of Bioengineering; Sichuan University of Science & Engineering;
【作者单位】	四川理工学院生物工程学院;
【文献出处】	微生物学通报 , Microbiology China, 编辑部邮箱 2015年 10期期刊荣誉：中文核心期刊要目总览 ASPT来源刊中国期刊方阵 CJFD收录刊
【中文关键词】	绿原酸; 内生菌; 分离; HAL基因; 活性;
【英文关键词】	Chlorogenic acid; Endophyte; Isolation; HAL gene; Activity;
【摘要】	【目的】分离产绿原酸的内生菌并对其绿原酸合成途径的一种关键酶基因进行克隆和功能研究。【方法】采用表面消毒法从金银花中分离内生菌,以高效液相色谱(HPLC)和液相色谱-质谱联用(LC-MS)筛选确定产绿原酸的内生菌,克隆、表达该内生菌的组氨酸解氨基酶(HAL)并进行酶活测定。【结果】从金银花根中分离到一株产绿原酸的内生细菌RP1,同时在该内生菌发酵液中检测到了绿原酸代谢的中间物肉桂酸。对RP1的分子鉴定表明该内生菌为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。对RP1的HAL基因进行克隆和原核表达,酶活测定表明该酶具有HAL和PAL(苯丙氨酸解氨基酶)双功能,其PAL活性产生的肉桂酸与LC-MS检测的结果一致。【结论】推测该内生菌可能利用其HAL的苯丙氨酸解氨基活性将苯丙氨酸的催化产物肉桂酸导入苯丙烷途径,从而产生绿原酸。
【英文摘要】	[Objective] To isolate a chlorogenic acid(CGA)-producing endophyte, and to study the function of a key gene of the CGA synthetic pathway from the endophyte. [Methods] Endophytes were isolated from Flos Lonicerae japonicae by surface sterilization. The endophytic bacterium producing CGA was screened and confirmed by HPLC and LC-MS. Histidine ammonia lyase(HAL) gene of the endophytic bacterium was cloned and expressed in Escherichia coli and enzyme activity of the recombinant HAL was determined. [Results] An ...
【基金】	四川省教育厅理工科重点项目(No.14ZA0211)
【更新日期】	2015-10-29
【分类号】	Q93;Q78
【正文快照】	在自然界中,药用植物中的活性物质多为植物次生代谢产物,这些活性成分一般都从植物体提取,其产量和质量难免要受到植物的遗传性、生长条件、收获时间及贮藏和运输等因素所影响。内生菌存在于几乎所有植物中,研究表明,内生菌可产生与宿主相同或相似的活性成分[1],这就使内生菌具

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