目的探讨鼻咽癌(NPC)肿瘤干细胞对抗顺铂诱导氧化应激损伤的机制。方法利用CCK-8法测定顺铂对NPC细胞CNE-2与NPC肿瘤干细胞CNE-2S的半数抑制浓度。观察不同浓度(0.1、0.5、1.0μmol·L-1)顺铂作用后,细胞内活性氧(ROS)、总谷胱甘肽(GSH)的含量及总超氧化物歧化酶(SOD)的活性改变。实时定量RT-PCR测定1μmol·L-1顺铂作用于2组细胞48 h后,谷胱甘肽合成酶(GSS)、γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶催化亚基(GCLC)、γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶调节亚基(GCLM)、SOD1和SOD2 m RNA的表达情况,免疫印迹法检测SOD2蛋白的表达情况。利用小干扰RNA技术沉默SOD2,并与1μmol·L-1顺铂共处理2组细胞,用台盼蓝染色观察细胞的存活情况。结果顺铂对CNE-2S的半数抑制浓度显著高于CNE-2(μmol·L-1:9.8±1.1 vs 2.4±0.6,P<0.05)。在不同浓度的顺铂处理后,2组细胞内ROS水平升高,但CNE-2S在处理前后的ROS水平均低于CNE-2(P<0.05)。1μmol·L-1顺铂刺激后,CNE-2S与CNE-2细胞中GSH含量均上升,但...
【英文摘要】
Objective To investigate the way that nasopharyngeal carcinoma(NPC) and NPC stem cells developsresistance to cisplatin through anti-reactive oxygen species mechanism. Methods Using CCK-8 cell counting kit, wemeasured the half inhibitory concentration of cisplatin against NPC cells CNE-2 and NPC stem cells CNE-2S, andcompared their resistant index. We examined the differences in the reactive oxygen species(ROS) levels, total glutathi-one(GSH) levels, and total superoxide dismutase(SOD) levels between CNE-2 a...
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