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灰产色链霉菌海藻糖合成酶的自诱导表达及两阶段温度控制发酵的优化  
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【英文篇名】 Auto-induced expression of Streptomyces griseochromogenes trehalose synthase gene in E. coli and optimization of its two-stage temperature controlling fermentation
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【作者】 杨鑫; 吴茜; 崔怀言; 徐娴; 朱丽英; 江凌;
【英文作者】 YANG Xin; WU Qian; CUI Huai-yan; XU Xian; ZHU Li-ying; JIANG Ling; Collage of Biotechnology and Pharmaceutical Engineering; Nanjing Tech University; Collage of Science; Collage of Food Science and Light Industry;
【作者单位】 南京工业大学生物与制药工程学院; 南京工业大学理学院; 南京工业大学食品与轻工学院;
【文献出处】 食品与发酵工业 , Food and Fermentation Industries, 编辑部邮箱 2015年 05期  
期刊荣誉:中文核心期刊要目总览  ASPT来源刊  中国期刊方阵  CJFD收录刊
【中文关键词】 海藻糖合成酶; 自诱导发酵; 两阶段温度控制策略;
【英文关键词】 trehalose synthase; auto-induced fermentation; two-stage temperature controlling strategy;
【摘要】 克隆灰产色链霉菌海藻糖合成酶基因(tres),导入大肠杆菌BL21(DE3)中高效表达,并对重组菌自诱导发酵条件进行优化。采用简并PCR的方法扩增灰产色链霉菌海藻糖合成酶基因(tres),将tres基因和表达载体p ET28a连接,构建重组质粒p ET28a-tres,将其转化到大肠杆菌BL21(DE3)中,筛选重组子进行自诱导表达。利用HPLC法测定酶活研究温度对自诱导发酵海藻糖合成酶催化酶活的影响。该研究成功构建了重组大肠杆菌BL21(DE3)。重组菌自诱导表达最优发酵条件:采用两阶段温度控制,37℃培养2.5 h,25℃继续培养14 h,并添加3%乙醇,酶活达到1.29×104U/m L,与传统IPTG恒温培养方式相比酶活提高了55.25%,海藻糖得率达71%。
【英文摘要】 A novel trehalose synthase gene was cloned from Streptomyces griseochromogenes YX-1 and overexpressed in Escherichia coli BL21( DE3),and the auto-induced fermentative condition of recombinant bacteria was further optimized. Trehalose synthase gene was successfully amplified from S. griseochromogenes by degenerate PCR. The amplified fragment was linked to p ET28 a to construct p ET28a-tres which were then transformed into E. coli BL21( DE3). The recon was screened and gene was expressed by auto-induced ferme...
【基金】 江苏省自然科学基金项目(BK20131046,BK20130917); 江苏省高校自然科学基金面上项目(14KJB530003); 教育部高等学校博士学科点专项科研基金(20123221120011)
【更新日期】 2015-07-08
【分类号】 TQ920.6
【正文快照】 海藻糖是自然界中普遍存在的一种非还原性二糖,作为一种天然的非特异性生物保护剂备受人们的瞩目[1]。随着海藻糖应用范围日益扩大,市场需求不断增加,开发一种简单经济的海藻糖生产工艺是目前亟待解决的问题。海藻糖合成酶(trehalose synthase,EC 5.4.99.16)是一种新型变位酶,?

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