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热稳定性对甲基对硫磷水解酶在毕赤酵母中分泌的影响  
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【英文篇名】 Effects of Thermal Stability on Secretion of Methyl-parathion Hydrolase in Pichia pastoris
【下载频次】 ★★
【作者】 龚攀; 范家佑; 田健; 伍宁丰; 初晓宇;
【英文作者】 GONG Pan; FAN Jia-you; TIAN Jian; WU Ning-feng; CHU Xiao-yu; College of Pharmacy; Guizhou University; Biotechnology Research Institute; Chinese Academy of Agricultural Science;
【作者单位】 贵州大学药学院; 中国农业科学院生物技术研究所;
【文献出处】 中国农业科技导报 , Journal of Agricultural Science and Technology, 编辑部邮箱 2015年 03期  
期刊荣誉：中文核心期刊要目总览  ASPT来源刊  CJFD收录刊
【中文关键词】 甲基对硫磷水解酶; 分泌; 热稳定性; 毕赤酵母;
【英文关键词】 methyl-parathion hydrolase; secretion; thermal stability; Pichia pastoris;
【摘要】 甲基对硫磷水解酶可生物降解有机磷农药,由于其特殊的应用价值,越来越受到人们的关注。来源于苍白杆菌的甲基对硫磷水解酶MPH-Och在毕赤酵母系统中不能有效地分泌表达。将热稳定性提高的突变体MPH-S274Q在毕赤酵母中表达,发现其毕赤酵母重组菌株经摇瓶诱导培养120 h后,培养上清的酶活力达到0.7 U/m L,蛋白分泌量是野生型的14倍,SDS-PAGE电泳图中培养上清有明显的蛋白质条带,进一步证明了分泌效率提高,该结果表明提高蛋白质的热稳定性可以作为提高外源蛋白在毕赤酵母中的分泌效率的一条有效途径。
【英文摘要】 Methyl parathion hydrolase can biodegrade organophosphorus pesticides. Due to its special application value,researchers paid more and more attension. Wild-type MPH-Och from Ochrobactrum sp. could not be secreted in Pichia pastoris. In order to increase the secretion level,the MPH-S274 Q mutant,which thermal stability was increased,was expressed in Pichia pastoris. After recombinant strain was induced by shaking culture flask for 120 h,the enzyme activity of culture supernatant reached 0. 7 U/m L. It was 14 ...
【基金】 国家863计划项目(2013AA102804); 国家自然科学基金项目(31100049)资助
【更新日期】 2015-07-13
【分类号】 Q814
【正文快照】 有机磷水解酶(organophosphorus hydrolase,EC3.1.8.1)能特异性水解甲基对硫磷的磷脂键而大大降低其毒性,其中,来源于Pseudomonassp.WBC-3、Plesiomonas sp.M6和Ochrobactrum sp.M231的甲基对硫磷水解酶(methyl parathionhydrolase,MPH)具有较高的比活性,有极大的开发价值[1]。

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