小麦叶片瞬时表达体系的优化-中国学术期刊网络出版总库

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小麦叶片瞬时表达体系的优化

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【英文篇名】	Optimization of Transient Expression System in Wheat Leaf
【下载频次】	★★★★★
【作者】	徐欢欢; 刘佳佳; 李娜; 马正强;
【英文作者】	XU Huanhuan; LIU Jiajia; LI Na; MA Zhengqiang; The Applied Plant Genomics Laboratory of Crop Genomics and Bioinformatics Centre; National Key Laboratory of Crop Genetics and Germplasm Enhancement; Nanjing Agricultural University;
【作者单位】	南京农业大学应用植物基因组学与生物信息学研究中心作物遗传与种质创新国家重点实验室;
【文献出处】	麦类作物学报 , Journal of Triticeae Crops, 编辑部邮箱 2015年 12期期刊荣誉：中文核心期刊要目总览 ASPT来源刊 CJFD收录刊
【中文关键词】	小麦; 叶片; 瞬时表达; 体系优化; 白粉病;
【英文关键词】	Wheat; Leaf; Transient expression; System optimization; Powdery mildew;
【摘要】	为了解决小麦叶片瞬时表达体系所存在的表达效率低、稳定性差、轰击不均匀等问题,利用GFP和GUS作为报告基因,通过改变叶片处理方式、质粒用量、质粒包裹方法和轰击距离,对小麦叶片瞬时表达体系进行优化,并将优化后的体系应用于小麦抗白粉病相关基因的功能鉴定,验证优化体系的有效性。结果表明,与未优化前的方法相比,叶片处理方式为乙醇,质粒用量为每枪1μg,质粒包裹方法采用扩大体系法,轰击距离为9cm时,瞬时表达效率显著提高且轰击更为均匀。应用该体系在感病小麦品种叶片中沉默隐性抗白粉病基因Mlo,显著降低了互作细胞吸器指数,进一步验证了目标基因的功能和优化体系的有效性。
【英文摘要】	In order to solve the problems existed in wheat transient expression system,such as low efficiency,poor stability and uneven bombardment,in this study,the transient expression system in wheat leaf has been optimized using GFPand GUSas reporter genes and the effectiveness in functional identification of wheat powdery mildew resistance genes has been verified.Four parameters,including treatment method of wheat leaf,plasmids DNA amount per shot,plasmids coating method and the distance between stopping screen a...
【基金】	国家自然科学基金项目(30771165)
【更新日期】	2016-01-11
【分类号】	S512.1
【正文快照】	瞬时表达是在靶细胞内暂时高效表达外源基因的一种技术。与稳定转化的基因表达方法相比,瞬时表达技术不需要将靶基因整合到植物基因组中,可快速研究基因的表达或功能,在启动子分析[1]、基因功能分析[2]、亚细胞定位[3]和蛋白互作[4]等方面均得到了广泛应用。在瞬时表达系统中常

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