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载脂蛋白C-Ⅲ基因沉默对HepG2细胞脂代谢的影响  
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【英文篇名】 Effects of the apolipoprotein C-Ⅲ gene silencing on lipid metabolism in HepG2 cells
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【作者】 田瑞敏; 张秀云; 张大蓉; 杨显金; 宋永砚;
【英文作者】 TIAN Ruimin; ZHANG Xiuyun; ZHANG Darong; YANG Xianjin; SONG Yongyan; Department of Pharmacology; School of Pharmaceutical Science; North Sichuan Medical College; Department of Biochemistry; School of Preclinical Medicine; Institute of Medical Imaging Research;
【作者单位】 川北医学院药学院药理学教研室; 川北医学院基础医学院生物化学教研室; 川北医学院医学影像学研究所;
【文献出处】 临床心血管病杂志 , Journal of Clinical Cardiology, 编辑部邮箱 2015年 02期  
期刊荣誉:中文核心期刊要目总览  ASPT来源刊  CJFD收录刊
【中文关键词】 载脂蛋白C-Ⅲ; 沉默; HepG2细胞; 脂代谢;
【英文关键词】 apolipoprotein C-Ⅲ; silencing; HepG2 cells; lipid metabolism;
【摘要】 目的:研究RNAi技术沉默载脂蛋白C-Ⅲ基因(ApoC3)表达后对HepG2细胞内外脂质含量及其他脂代谢相关基因表达的影响。方法:合成3对针对ApoC3mRNA不同位点序列的小干扰RNA(siRNA),并分组转染至人肝细胞株HepG2,实时荧光定量PCR和酶联免疫吸附法检测ApoC3mRNA及蛋白质的表达水平,筛选出沉默效果最佳的一对siRNA。将最有效的siRNA转染HepG2细胞,48h后测定细胞内外脂质含量以及脂代谢相关基因的mRNA表达水平。结果:25nmol/L siRNA和3μl/孔(24孔板)转染试剂的转染效率最高。ApoC3-siRNA-3对ApoC3基因的沉默效果最好,对mRNA的抑制率为94.6%,上清液中检测不到ApoC-Ⅲ。ApoC3-siRNA-3沉默ApoC3基因后细胞内三酰甘油(TG)和胆固醇含量显著高于对照组,细胞外TG含量显著低于对照组。与对照组比较,ApoC3-siRNA-3沉默组载脂蛋白B100基因mRNA表达水平显著增强,肝脂酶基因mRNA表达水平显著降低。结论:ApoC3基因沉默可显著升高HepG2细胞内TG含量及显著降低细胞外TG含量,其可能机制是通过减少极低密度脂...
【英文摘要】 Objective:To investigate the effects of apolipoprotein C-Ⅲ gene(ApoC3)silencing by RNA interfering on the lipid contents in HepG2 cells or in the culture medium,and the expression patterns of the genes related to lipid metabolism.Method:Three pairs of small interfering RNA(siRNA)targeting different sequences of ApoC3 mRNA were synthesized and transfected into human hepatoma cell line HepG2 to screen the most effective siRNA.Real-time fluorescence quantitative RCR and enzyme-linked immunosorbent assay detect...
【基金】 四川省应用基础研究计划(No:2013JY0072)
【更新日期】 2015-03-11
【分类号】 R329.2
【正文快照】 高三酰甘油血症(hypertriglyceridemia,HTG)是心血管病(cardiovascular disease,CVD)的独立危险因素[1-2]。流行病学调查[3]和实验研究[4]均显示载脂蛋白C-Ⅲ(ApoC3)血浆浓度升高以及在脂蛋白中的分布异常与HTG和CVD密切相关。本研究首次运用RNA干扰技术(RNA inter-ference,RNA

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