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钙激活中性蛋白酶-2对整合素β4水解的影响  
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【英文篇名】 Research on the Effect of Calpain-2 on the Proteolysis of Integrin β4 in MCF7 Cell
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【作者】 胡晓霞; 霍建云; 张金娟; 潘娅; 王晋星一; 陈妮; 张祥令; 陈腾祥;
【英文作者】 HU Xiaoxia; HE Jianyun; ZHANG Jinjuan; PAN Ya; WANG Jingxingyi; CHEN Ni; ZHANG Xiangling; CHEN Tengxiang; Department of Physiology; Guiyang Medical College; Functional Laboratory; Department of Histology and Embryology;
【作者单位】 贵阳医学院生理学教研室; 贵阳医学院机能学实验室; 贵阳医学院组织胚胎学教研室;
【文献出处】 贵阳医学院学报 , Journal of Guiyang Medical College, 编辑部邮箱 2015年 01期  
期刊荣誉:ASPT来源刊  CJFD收录刊
【中文关键词】 乳腺肿瘤; 钙激活中性蛋白酶2; 整合素β4; 蛋白水解; 基因沉默;
【英文关键词】 breast neoplasms; calcium-activated neutral proteases 2; integrein β4; proteolysis; gene silencing;
【摘要】 目的:观察乳腺癌细胞系MCF7细胞中,钙激活中性蛋白酶2(calpain-2)对整合素(integrin)β4水解的影响。方法:利用短发夹RNA(shRNA)和微小RNA(mirRNA)技术结合的calpain-2基因沉默(gene silencing)慢病毒质粒(GIPZ lentiviral shRNAmir)转染乳腺癌细胞株MCF7,嘌呤霉素筛选稳定沉默calpain-2基因的细胞株,细胞株传4代,用荧光显微镜观察转染效率,用蛋白质印迹(Western blot)实验检测calpain-2基因沉默效率及integrinβ4水解的情况。结果:嘌呤霉素筛选、细胞传4代,荧光显微镜下观察显示转染和筛选后,EGFP表达阳性的MCF7细胞的比例分别达到(95.6±2.6)%(空shRNAmir载体)、(97.1±1.7)%(Calpain-2 shRNAmir1)和(97.7±0.2)%(Calpain-2 shRNAmir 2),差异无统计学意义(P>0.05);Western blot结果显示,基因沉默的MCF7细胞中calpain-2的表达被明显抑制,相对于空shRNAmir载体转染的MCF7细胞,差异有统...
【英文摘要】 Objective: To observe the effect of calcium-activated neutral proteases 2( calpain-2) on proteolysis of integrin β4 in breast cancer cell line,MCF7. Methods: Plasmids of GIPZ lentiviral shRNAmir combined with shRNA and microRNA( miRNA) technology were transfected into MCF7 cells to silence the expression of calpain-2. The puromycin was used to screen MCF7 with 4 passages to acquire the stable calpain-2-silenced cell lines. The transfected rates were evaluated with immunofluorecence method under microscope,a...
【基金】 国家自然科学基金资助项目(NO.81060176); 贵州省科技厅自然基金项目[黔科合J字(2008)2280]; 贵阳市科技局社会发展公关计划项目[筑科农字(2010)1号]
【更新日期】 2015-03-05
【分类号】 R737.9
【正文快照】 整合素(integrin)β4是整合素亚家族成员之一,整合素属细胞表面的黏附分子,构成细胞与细胞外基质及细胞之间的联系。在上皮细胞膜表面,integrinβ4与另外1个亚家族成员integrinα5形成二聚体,作为一个功能单元与网格蛋白(plectin)、大天疱疮抗原2(bullous pemphigoid antigen 2

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